邵佳月 孙秀威

结肠癌是癌症死亡的第二常见原因[1]。结直肠癌化学治疗的主要用药是5-fluorouracil(5-FU)和奥沙利铂。结肠癌有较高的复发率和转移率。II期结肠癌患者手术后的复发率约20%～30%。此外，一些III期癌症患者接受化学治疗无效，所以尝试联合用药迫在眉睫。大蒜素是大蒜的主要活性成分之一，是大蒜中最具生物活性的化合物之一，大蒜具有多种生物活性，包括抗动脉粥样硬化，降压、抗菌、抗癌、免疫调节、抗辐射以及潜在的抗衰老作用[2-3]。大蒜素是新鲜大蒜的主要成分，是由蒜氨酸通过酶作用形成的[4-5]。大蒜素对胃癌、结肠癌、肝癌、肺癌等多种肿瘤细胞有明显的抑制作用，已作为临床辅助药物进入临床治疗，激活凋亡信号通路可能是治疗恶性肿瘤的有效途径，但大蒜素发挥其凋亡作用的机制尚不完全清楚[6]。鉴于结肠癌的高发病率及大蒜素在肿瘤治疗中的重要作用，本实验旨在探讨大蒜素与5-FU联合应对结肠癌HT29细胞的生长抑制和诱导凋亡作用机制。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

青霉素、链霉素和胰酶购自Hyclone公司；胎牛血清、1640培养液与HT29细胞购自上海中桥新舟公司；CCK-8试剂盒购自日本Dojindo公司；大蒜素购自大连美伦公司；5-FU购自Sigma公司；光学显微镜购自日本Olympus公司；酶标仪购自瑞士TECAN公司；Direct DetectTMSpectrometer-Sample Measuring红外微定量分析仪购自德国Merck Millipore公司；实时荧光定量PCR仪购自德国Roche公司。

1.2 细胞培养

将结肠癌HT29细胞株置于含10% FBS及1%双抗的1640培养基中，置于含5% CO2、37℃饱和湿度的CO2培养箱中培养，2～3天换一次液，待细胞铺满培养瓶底面积80%以上对细胞进行传代，采用对数生长期的细胞进行后续实验。……