二咖啡酰基奎宁酸MQA抗MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤作用研究
2018-08-30信小兵李林田星张珂刘丹妮王航宇王金辉
信小兵 ,李林 ,田星 ,张珂 ,刘丹妮 ,王航宇 ,王金辉 ,2*
(1石河子大学药学院/新疆植物药资源利用教育部重点实验室,新疆 石河子 832002;2哈尔滨医科大学药学院,黑龙江 哈尔滨 150081)
帕金森病(Parkinson's Disease,PD)是一种严重困扰人们健康的神经退行性疾病,多发于中老年人群。目前,在我国60岁以上人群中PD患病率大于1%。研究表明,PD是一种由于黑质-纹状体多巴胺能神经元变性、坏死,而导致以震颤、肌僵直和运动迟缓等临床症状为特征的神经变性疾病[1]。目前,对帕金森病的治疗还没有特效药,已经上市的药物都因为疗效不佳或毒副作用大较难满足要求。因此,寻找具有神经保护作用的天然药物活性成分对于PD的治疗很有意义。
1,5-O-二咖啡酰-3-O-(4-苹果酸甲酯)-奎宁酸 (1,5-O-dicaffeoyl-3-O-(4-malic acid methyl ester)-quinic acid,MQA)是从牛蒡根中提取分离得到的一种二咖啡酰基奎宁酸类化合物[2]。目前报道这类化合物具有许多的生物活性,如抗氧化、抗菌、抗肿瘤和抑制α糖苷酶的作用[3-4]。研究表明[5]二咖啡酰基奎宁酸类化合物可抑制Aβ42诱导的SH-SY5Y细胞损伤。在此基础上,本实验将在1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)诱导的SH-SY5Y细胞损伤模型上,建立体外PD模型,考察MQA抗MPP+诱导的细胞损伤作用及其作用机制,为进一步开发全新治疗帕金森病的药物打下基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药品及主要试剂
MQA单体(由本实验室自制,纯度 98%);小牛血清(杭州四季青生物制品公司,批号:150520);DMEM 培养基(GIBCO公司,批号:129007);山羊抗小鼠抗体(批号:127655)、山羊抗兔抗体(批号:129256)、β-actin抗体(批号:16A00205)均购自北京中杉金桥生物技术有限公司;AMPKβ1/2抗体(批号:57C12)、LC3A/B 抗体(批号:D3U4C)、Beclin-1抗体(批号:D40C5)均购自Cell Signaling Technoligy公司;……