人食管鳞癌细胞球细胞的干细胞特性研究

2018-08-30李秋实王飒王文强慕晓玲

石河子大学学报(自然科学版) 2018年3期

李秋实王飒，王文强，慕晓玲

（1石河子大学医学院/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室，新疆石河子 832000；2河南大学第一附属医院放射科，河南开封，475000）

食管癌是目前世界范围内最常见的六大恶性肿瘤之一，其发病率在中国最高[1]。肿瘤干细胞(Cancer stem cells，CSC s)的研究，对肿瘤的临床诊断和治疗有着重要意义，食管肿瘤干细胞的分离和鉴定是研究食管癌靶向治疗的重要途径。本课题组黄燕燕[2]。通过无血清成球培养法获得食管癌Eca109细胞球并观察了其干细胞特性及p75NTR表达情况，推测细胞球中p75NTR核表达阳性的球细胞有可能是食管癌干细胞。但是细胞球细胞都是干细胞，还是仍然是异质性细胞群，未发现相关报道。

本研究从人食管癌细胞株Eca109细胞中分离培养出不同代次的细胞球细胞，观察p75NTR和Ki67的表达，并对其增殖和侵袭能力进行分析，为进一步证实细胞球细胞是癌干细胞以及p75NTR核阳性表达的球细胞是食管癌干细胞提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

人食管鳞癌细胞系Eca109细胞 (中国科学院上海细胞库)；DMEM/F12无血清培养基、高糖DMEM培养基、胎牛血清和胰酶 (GBICO公司)；B27(Invitrogen公司)，兔抗人p75NTR、Ki67单克隆抗体(abcom公司)；山羊抗鼠IgG-FITC二抗、山羊抗兔IgG-TRITC二抗(北京中杉金桥生物技术有限公司)；Cell Counting Kit-8(日本同仁化学研究所CCK-8试剂盒)；1.2 μm孔径 Matrigel Matrix基质胶 (BD公司)；24 孔 Tanswell小室 (Millipore公司)；LSM-510 激光共聚焦显微镜(德国CarlZeiss公司)。