许海东

（四川省医学科学院 四川省人民医院，急诊内科，四川 成都 610072）

目前，肺癌是我国发病率最高的恶性肿瘤之一[1]，由于其早期症状隐匿，手术后易复发且放化疗敏感性低等生物学特点，肺癌已成为危害我国人民群众身体健康的重大公共卫生问题[2]。肺癌病理类型复杂其中以肺鳞状细胞癌（lung squamous cell carcinoma, LSCC）之类型最为常见[3]，对肺鳞状细胞癌分子特征的研究对于寻找新的肺癌预后靶点具有重要意义。

血管扩张刺激磷蛋白（vasodilator stimulated phosphoprotein, VASP）是Enabled（Ena）/VASP家族主要成员[4]，是构成细胞骨架的相关蛋白之一[5]。研究发现肿瘤组织中VASP的表达情况与癌症细胞侵袭、转移及患者生存获益密切相关[6]。因而，VASP可能是一种重要的肿瘤诊断及预后分子，而VASP在肺鳞状细胞癌中的临床意义尚不完全清楚。

本研究探讨VASP在肺鳞状细胞癌中的临床表达意义，以期使VASP成为肺鳞状细胞癌诊断、治疗的分子标志物提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2011年1月-2013年1月于本院手术切除鳞状细胞癌以及癌旁组织（距肿瘤边缘＞2 cm）50例组织标本。其中，男性35例，女性15例；年龄45～77岁，平均（54.3±2.1）岁。

兔抗人Super Vision（SV）二步法超敏免疫组织化学（简称免疫组化）试剂盒（SV0002）（购自武汉博士德公司，内容包括：5%牛乳清蛋白封闭液、聚合HRP标记抗兔IgG、3%过氧化氢溶液），兔抗人VASP一抗（sc-13975）及GAPDH一抗（购自美国Santa cruz公司），Trizol试剂（15596026）及LipofectamineTM3000转染试剂（L3000015）、一步法RT-PCR试剂盒（10928042）（购自美国Invitrogen公司），VASP siRNA（5'-GGACCUACAGAGGGUGAAAdTdT-3'）、阴性对照siRNA（购自广州复能基因有限公司），VASP引物（正向5'-AAAGTCAGCAAGCAGGAGGA-3'；反向5'-ATTC ATCCTTGGGGGTTTTC-3'）；GAPDH 引物（正向 5'-CG GAGTCAACGGATTTGGTCGTAT-3'；反向5'-AGCCTT CTCCATGGTGGTGAAGAC-3'）（由上海生工生物工程公司合成），Transwell小室（#3458）（购自美国康宁公司），Matrigel（货号：354230）（购自美国B&D公司）。……