王佳微，傅红兴，赵应征，杨丽斌，耿武军

（1．温州医科大学药学院，浙江 温州 325035；2．温州医科大学附属第一医院麻醉科，浙江 温州 325035）

bFGF是碱性成纤维细胞生长因子，是体内已知的作用最强的促血管生长因子[1]。本实验通过有无结合含bFGF的生物胶与胰岛细胞团共移植的比较，监测血糖和体重变化，并且通过HE染色和免疫组化染色进行组织学评价，探测bFGF在体内对小鼠胰岛微血管修复的影响及通过血管修复对于控制血糖的作用。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物

Balb/c小鼠10只，体重约22 g，由温州医科大学实验动物中心提供。

1.1.2 试剂和实验器材

Ⅴ型胶原酶（Sigma公司，美国）；Ficoll-1077、Ficoll-1119、CMRL 1066培养液（温州怡康细胞移植技术开发有限公司，中国）；Hanks液（自配）；胎牛血清（四季青公司）；二乙酸荧光素（FD）（Sigma公司）；Anti-Insulin（Abcam公司）；bFGF（浙江格鲁斯特生物科技有限公司）；透明质酸钠（湖北远成赛创科技有限公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 60 ng/mL bFGF透明质酸钠胶制备

（1）精密称取20 mg透明质酸钠粉末至1支4 mL无菌的EP管中，盖子不用盖紧，将其用纱布包裹后放入灭菌盒中；（2）将其置于高温高压蒸汽灭菌锅中灭菌，灭菌时间为5～10 min；（3）将灭菌好的装有透明质酸钠粉末的EP管置于超净工作台中，向此EP管中加入2 mL 60 ng/mL bFGF细胞培养液，搅拌均匀使其成半流动性凝胶状，即得到10 mg/mL含60 ng/mL bFGF透明质酸钠胶；（4）用封口膜封口后置于4℃冰箱过夜保存，以去除配制中产生的气泡。

1.2.2 ICR小鼠皮下移植

（1）将准备移植的糖尿病小鼠在移植前20 min皮下注射50 μL头孢唑啉钠，小鼠采用持续吸入异氟烷麻醉；（2）待小鼠麻醉后，剃去腹股沟处周围……