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分子生物学技术在检验检疫中的应用

2018-07-30李萍

魅力中国 2018年5期
关键词:应用

李萍

摘要:目的:探究分子生物学技术在检验检疫中的应用价值。方法:选择我院自2016年3月至2017年9月收集80例微生物标本(包含21例流感病毒、17例幽门螺杆菌病毒、20例支原体病毒、22例金黄色葡萄杆菌毒素基因)作为研究对象,将所有标本分成均等的两份,一份采用传统检测方法进行检验(设为对照组),另一份采用分子生物学技术方法进行检验(设为研究组),比较两组检测方式的检出率。结果:研究组对流感病毒的检出率(95.2%)明显高于对照组(71.4%),研究组对幽门螺杆菌病毒的检出率(100.0%)明显高于对照组(82.3%),研究组对支原体病毒的检出率(100.0%)明显高于对照组(70.0%),研究组对金黄色葡萄杆菌毒素基因的检出率(95.5%)明显高于对照组(77.3%),两组对比差异显著(P<0.05)。结论:分子生物学技术能有效提升微生物检验检疫的准确率,因此其具有良好的检验检疫价值。

关键词:分子生物学技术;检验检疫;应用

分子生物学检测技术是建立在核酸生化基础上的现代化检测技术和研究手段,通过对

生物大分子核酸及核酸表达产物蛋白质功能、结构、相互之间的作用和关系进行研究,其能有效为临床疾病的诊断和评估、病原微生物检验、食品安全检测以及寄生虫病防治提供重要的检验依据,因此被广泛应用于微生物学、遗传学、医学以及食品检验学等多个领域的检验检疫中。除此之外,其还具有操作简便、特异性强以及灵敏度高等多种优势,因此其已成为现代临床和免疫检验最重要的检测手段[1]。本文主要探究了分子生物学技术在检验检疫中的应用价值,现报道如下。

一、资料与方法

(一)一般资料

选择我院自2016年3月至2017年9月收集80例微生物标本作为研究对象,其中21例为流感病毒、17例幽门螺杆菌病毒、20例支原体病毒、22例金黄色葡萄杆菌毒素基因,分别对其采用传统检测方法和分子生物学技术进行检测。

(二)方法

将所有标本分成均等的两份,一份采用细菌培养鉴定、免疫测定及血清学检验等传统的检测方法进行检测,另一份采用以聚合酶链反应技术为基础的分子免培养方法和核酸检测技术进行检验,通过在病原体中加入特异性引物进行扩增检验。

(三)观察指标

观察和统计两种检测方式对微生物标本病原体的检出率。

(四)统计学分析

采用SPSS22.0软件对所得数据进行统计分析,计量资料用(x±s)表示,采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。

二、结果

研究组对流感病毒的检出率(95.2%)明显高于对照组(71.4%),研究组对幽门螺杆菌病毒的检出率(100.0%)明显高于对照组(82.3%),研究组对支原体病毒的检出率(100.0%)明显高于对照组(70.0%),研究组对金黄色葡萄杆菌毒素基因的检出率(95.5%)明显高于对照组(77.3%),两组对比差异显著(P<0.05),见表1。

三、讨论

在人们生存的各个领域均具有生物技术的存在,例如水质、空气、食品、疾病检测等,而了解和评估水质、空气、食品的构成成份或质量好坏以及明确疾病的类型和分型均需依赖于微生物检测技术的支持。以往对微生物检验和鉴定都是采用大量的特征试验进行分离纯化,这样的检验方式不仅操作繁杂和需耗费较多的人力、时间,同时其还难以保证检测结果的准确率,导致检测结果易出现误差,从而难以保证被检测食品的安全以及可能造成疾病延误诊断与治疗。而随着检验检疫技术的不断改革与发展,现代临床与检验免疫中心已引进了分子生物学技术进行微生物检验,分子生物学技术包含了聚合酶链反应、基因克隆和重组、核酸杂交法、变性凝胶电泳及生物芯片等多种现代化的检验技术,其不仅能有效缩短微生物分离鉴定的速度,同时还能使微生物检验检疫达到全面、快速、微量、准确等检验要求,因此该项检验技术已被广泛应用于各种微生物的检验检疫中。

在微生物检验中,属聚合酶链反应、生物芯片及核酸杂交法等分子生物学技术应用最为广泛,其中聚合酶链反应技术又包含了普通聚合酶链反应、巢式聚合酶链反应、多重聚合酶链反应、反转录聚合酶链反应、荧光定量聚合酶链反应、聚合酶链反应单链构象多态性、RAPD技术、限制性片段长度多态性、重复序列聚合酶链反应技术、随机扩增的多态性DNA技术等多个类别,这种类型的检测技术主要是通过将多种特异性引物加入到病原体中,从而避免了分离纯化的操作,其不仅能对多种病原体进行同时检测,同时还能准确鉴定出病原体的感染类型[2]。例如,本次研究中所检测的流感病毒,通过在病原体标本中加入特异性引物扩增,可依据扩增片段的大小判定流感属于什么类型。另外,对于病毒重叠感染的病原体,其能通过对病原体的霍乱、痢疾和伤寒指征进行快速检测,从而明确疾病的感染分型。而对于传统检测方式难于培养的微生物或生长缓慢的病毒进行鉴定,可以应用聚合酶链反应技术联合分子荧光检测技术进行检测。对于包括死菌在内的菌体进行检验,采用聚合酶链反应技术鉴定只需挑取菌体,无需提取核酸,因此能有效加快检测的速率。

食品检测安全也是人们重点关注的内容之一,食品中的微生物主要包含了金黄色葡萄杆菌毒素基因、顽固性梭状芽孢杆菌、肠毒素大肠杆菌及单核细胞增多性李斯特氏菌等,在以往的检测过程中,多采用血清学检验方法和细菌学检验方法,如凝集反应、细菌分离培养等方式进行检测,这两种检测方式操作均较为繁琐和检测耗时较长,从本次的检验结果也可以看出其检测的准确率并不高,而采用分子生物学检验技术,将能有效避免上述缺陷和问题发生,采用聚合酶链反应技术通过设计金黄色葡萄杆菌毒素基因引物,不仅具有较高的敏感性和特异性,同时还能在较短时间内检出葡萄球菌毒株。另外对于食品中一些

常见的病原菌,如发酵食品中的益生菌、奶酪表面的微生物、酒中的乳酸菌等,可采用核酸探针技术进行检测;对于食品的营养成分、微生物种群以及对食品安全、质量、卫生进行监测,还可采用基因芯片技术进行检测,其是一种基于基因功能和表达的最新分子生物学检验技术。

本次研究结果显示,分子生物学检验技术在对多种微生物病毒和食品检测指标中的检出率均明显高于传统检测方法,说明了分子生物学技术不仅可以应用于多种领域的检验检验,并且与传统的检测方式相比,分子生物学检验技术对微生物的检测敏感度和特异性更强。

综上所述,分子生物学技术能有效提升微生物检验检疫的准确率,因此其具有良好的检验检疫价值。

参考文献:

[1]章志建,潘虹.分子生物學技术在检验检疫中的应用[J].现代预防医学,2015,42(03):526-527+536

[2]王金凤,王建昌,付琦,等.分子生物学技术在出入境动物检疫中的应用[J].黑龙江畜牧兽医,2014,(17):216-218

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