秦岭滑蜥视网膜年龄相关的显微结构特征和胶质纤维酸性蛋白免疫组织化学定位
2018-07-25高燕燕李琳赵禹朱妞杨纯
高燕燕, 李琳, 赵禹, 朱妞, 杨纯
(山西师范大学生命科学学院,山西临汾041004)
蜥蜴亚目Sauria视网膜结构和机能与各自的生活习性一致(张育辉,贾林芝,2003),且具有特殊的视觉再生能力(Langetal.,2002)。视网膜结构的增龄改变必然影响机体的视觉功能(孙庆艳等,2004)。胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)在星形胶质细胞中的表达可反映其功能活动状态(Biginietal.,2001;Williams,2017)。视网膜Müller细胞中表达GFAP是成体脊椎动物的共同特征(Sassoèetal.,1992)。GFAP在无蹼壁虎Gekkoswinhonis视网膜中的分布特点及年龄相关性变化,提示Müller细胞可能通过增强或减弱GFAP表达参与视网膜衰老过程中的生理功能调节(王智超等,2008)。
秦岭滑蜥Scincellatsinlingensis是我国特有的卵胎生蜥蜴(赵尔宓,1999),为《国家保护的有益的或者有重要经济、科学研究价值的野生动物名录》收录物种(王志宝,2000),相关研究局限于其部分器官系统的组织形态学(谢权等,2012;王丽敏等,2015,2016;Yang & Wang,2016;Yangetal.,2017),尚无视网膜显微结构增龄性变化的相关报道。因此,对秦岭滑蜥幼体、亚成体和成体视网膜结构以及GFAP阳性表达变化进行探究,旨在积累蜥蜴类爬行动物视觉器官发育的基础资料。
1 材料与方法
1.1 材料
秦岭滑蜥采自山西省霍州市太岳山七里峪林区(110°40′~112°21′E,36°21′~36°45′N),雌雄兼有。根据吻肛长(SVL)分为幼体组(SVL<48.08 mm)、亚成体组(48.08 mm≤SVL≤57.08 mm)、成体组(SVL>57.08 mm)(马小梅,计翔,2001;王丽敏,2016),每组6只。实验动物经乙醚麻醉致死后,剥离眼球,置于不同固定液中。
1.2 常规组织化学染色
材料经Bouin’s液固定后,梯度乙醇脱水,透明,石蜡包埋,8 μm连续切片,苏木精-伊红染色。
1.3 免疫组织化学染色
材料经4%多聚甲醛固定过夜后,放入蔗糖溶液中梯度脱水,OCT包埋剂包埋,连续冰冻切片,切片厚度20 μm,-20 ℃保存,用于GFAP免疫组织化学染色。……
