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免疫亲和柱净化-HPLC-FLD法测定天麻药材中黄曲霉毒素的含量

2018-07-13张玉莲郑希望

机电信息 2018年20期

张玉莲 宋 嬿 郑希望

(上海上药华宇药业有限公司,上海200001)

0 引言

黄曲霉毒素是一类化学结构类似的化合物,均为二氢呋喃香豆素的衍生物,主要是由黄曲霉(aspergillus flavus)、寄生曲霉(a.parasiticus)产生的次生代谢产物,它们存在于土壤、动植物、各种坚果中,是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素。1993年,黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物。

目前已发现的黄曲霉毒素有二十余种,主要的有B1、B2、G1、G2四种,其中毒性最强的为B1。

天麻(Gastrodiae rhizome)来源于兰科植物天麻Gastrodia elata Bl.的干燥块茎,其具有息风止痉、平抑肝阳、祛风通络的功效,是名贵中药材。研究并建立天麻药材中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量的测定方法,可以为天麻药材质量的评价与控制提供依据。

本研究采用免疫亲和柱净化-高效液相色谱(HPLC)-荧光光度检测(FLD)法,测定天麻药材中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量。

1 材料与仪器

1.1 材料

1.1.1天麻药材

天麻药材均从各产地直接购买,并经上海市中药行业专家张增良老师鉴定为天麻Gastrodiae rhizoma。

1.1.2主要试剂

乙腈、甲醇(色谱级),购自德国默克公司;氯化钠(优级纯)、碘(分析纯)、吐温-20,购自国药化学试剂公司;免疫亲和柱,购自美国Beacon公司;黄曲霉毒素混合对照品(98%),购自上海安谱公司;PBS缓冲液,购自德国GE公司;亲水性PTFE微孔滤膜(25 mm×0.45μm),购自上海驷虎科技公司。

1.2 仪器

1.2.1仪器配置

Agilent 1200 Series高效液相色谱仪(配套FLD检测器),安捷伦公司;Pickering Vector柱后衍生化仪,美国Pickering公司;METTLER TOLEDO XS205DU分析天平,梅特勒-托利多公司;Anke TDL-5000B离心机,上海安亭公司;Milli-Q Reference纯水机,密理博公司。

1.2.2色谱条件

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