藻油中DHA-EE的HPLC快速定量方法的建立
2018-07-13谢枫才孙继鹏
谢枫才,张 宾,孙继鹏
(1.浙江海洋大学食品与医药学院,浙江 舟山 316022;2.国家海洋局第三海洋研究所,国家海洋局海洋生物资源综合利用工程技术研究中心,福建 厦门 361005)
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二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)属ω-3多不饱和脂肪酸,是人类大脑及视网膜的重要成分。DHA具有调节人体内脂蛋白、血脂正常代谢和降血压作用,并能降低血液黏稠度和胆固醇水平,预防动脉硬化[1-4]。大量研究表明,DHA缺乏会引起婴幼儿或儿童脑部发育受阻,致使视力障碍及记忆力下降[5-6]。鱼油中富含丰富的DHA,市场上的DHA 产品主要是从深海鱼油中提取,但是鱼油易受到环境、气候等因素影响而发生劣变,目前其产量仅能满足世界需求量的60%左右[7]。
微藻在海洋中的角色为初级生产力,许多微藻能自身合成DHA,其DHA相对含量远远高于鱼油中DHA含量[8]。此外,藻油属于食物链最低端,其不含海洋污染物和胆固醇,且较为纯净、腥味小及稳定性好,产品回收率高于鱼油[9-10]。研究表明,同等剂量不同来源的DHA 对儿童记忆力的影响具有相同作用[11],因此,藻油作为DHA的重要来源一直备受关注。DHA可分为甲酯型、乙酯型、甘油酯型和游离型4类。目前市场上DHA产品多为乙酯型,如美国FDA药品数据库收载的6个ω-3多不饱和脂肪酸[12]、美国药典(USP35)和欧盟药典(07/2012:1250)收载的ω-3多不饱和脂肪酸均为乙酯型。
对于鱼油及藻油产品中DHA的检测方法,目前主要采用气相色谱法[13-14],但由于DHA属于长链脂肪酸,不易气化,所以检测时需在较高温度下进行且分析时间较长[15]。因此,为避免高温对DHA稳定性的影响,人们逐渐尝试采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)作为DHA含量的检测分析方法[16]。……