胡萝卜、香菇根对杏鲍菇母种菌丝生长的影响

2018-07-11曹力凡毋柳柳

现代园艺 2018年13期

曹力凡，毋柳柳，孟　丽

（河南科技学院生命科技学院　453003）

杏鲍菇含有较高的营养，其中包含蛋白质、碳水化合物、维生素及钙、镁、铜、锌等矿物质成分，不仅可以提高人体对外界的免疫功能，而且对人体具有抗癌、降血脂、润肠胃以及美容等多种作用[1]。杏鲍菇菌肉肥厚，质地脆嫩，特别是菌柄组织致密、结实、乳白，可全部食用，且菌柄比菌盖更脆滑、爽口，被称为“平菇王”、“干贝菇”[2]。并且具有杏仁香味和如鲍鱼的口感，适合保鲜、加工，深得广大消费者的喜爱。杏鲍菇是近几年来开发并栽培成功的集食用、药用、食疗于一体的珍稀食用菌新品种[3]。通过对杏鲍菇进行母种组织块分离试验，采用了胡萝卜、香菇根培养基配方进行对比实验，目的是选择出适合杏鲍菇母种分离和菌丝生长的培养基[4]，以保证该培养基在菌种纯化、菌种生产、菌种保藏及其它领域的科学应用[5]。

1　试验材料

1.1　供试菌株

杏鲍菇3号,经组织分离获得母种；由河南科技学院食用菌实验室提供。

1.2　供试材料

马铃薯、葡萄糖、琼脂条、胡萝卜、香菇根。

1.3　试验器材

准备阶段工具：恒温培养箱、高压灭菌锅、超净工作台、电磁炉、三角瓶、棉塞、75%酒精。接种工具：接种铲、培养皿、酒精灯、封口膜、酒精棉。[1]

2　试验方法

2.1　试验设计

本试验主要研究在杏鲍菇的培养中，不同添加物对其生长的影响。在培养基配制过程中，培养基中添加胡萝卜的A组，添加香菇根的B组以及只有培养基的对照组。接种后，放在适宜的条件下培养，保持温度、光照和湿度等外界条件相同。每天观察1次，测量并记录菌丝的生长量。

2.2　培养基配制

马铃薯（PDA）培养基：1000mL水，250g马铃薯，20g葡萄糖，20g琼脂。准确称量所需要的物质，先加水把琼脂熬成液体再加入其他物质。在PDA培养基的基础上分别加入 20g、40g、60g、80g 和 100g 的胡萝卜和香菇根[6]，其他物质保持一致，配制好的培养基要及时塞上棉塞。分装后做好标记，等待灭菌。

2.3　接种与灭菌[7-8]

2.3.1倒平板。把灭过菌的培养基放入无菌操作台，无菌操作台提前用紫外灯照射30min。然后打开风扇和白炽灯，把灭过菌的培养基分成10份把熬制好的胡萝卜汁和香菇根汁按一定的比例分别加入10份培养基中，用玻璃棒搅匀。然后把灭过菌的平板打开，依次把搅拌好的每个培养基倒在6个重复的平板上，并给每组平板贴上标签。然后把倒过的平板依次放好等待其凝固，并把超净台打扫干净。把接种所需要的工具放入超净台内，最后把灯和风扇关掉——把紫外灯再打开杀菌。

2.3.2接种。接种前准备，把培养基、实验菌株、接种工具放在超净工作台上，打开紫外灯照射25min，然后通风5min。接种前要带上塑料手套并按规定消毒。把酒精灯点燃，用接种铲把菌种分割成0.1cm2的小块。右手拿接种铲挑去1块，左手拿培养皿在酒精灯火焰上方进行接种。接种时菌种带的培养基不要过厚，接种前接种铲要在火焰上灼烧等接种铲冷却后，每进行挑取菌种，以免接种铲温度过高烫死菌种。接种过的培养皿要用封口膜进行封口，以免染菌。

2.3.3采用高压灭菌锅灭菌。把准备好的培养基和培养皿放入灭菌筐中，把灭菌筐放入灭菌锅中，在放入之前先观察灭菌锅的水位是否处于高水位状态，如果不是高水位要往里面加水，不然容易损坏灭菌锅。在确保有水情况下盖好盖子，设置温度为121℃，设置时间为20 min。让灭菌锅开始工作，排气阀先不要关闭，等温度上升到100℃时再进行关闭，这样才能把锅内的冷空气排净，不会造成灭菌不彻底。如果不排除锅内冷空气或排除不彻底就会造成假压，也就是压强上去了可温度却上不去，这样就达不到灭菌的目的。灭菌完成后要打开排气阀门，使里面的蒸汽排尽后，压力表的指数为零时再打开锅盖。打开锅盖时一定要用湿抹布垫手，以免被高温的锅盖烫伤。接种完毕以后放在恒温培养箱里（25℃）培养。

2.3.4培养并隔天进行记录数据。把接种过的培养基放入培养箱中培养，并每隔1天记录1次数据。把培养皿从培养箱中取出，取出之前要用75%的酒精擦拭双手进行消毒（以减少培养基染菌的机率）。然后再取出要测量的培养基，观察菌丝的生长情况，并用记号笔对菌丝往外扩增的距离做1个记号。以接种点为圆心用直尺测量出接种点到标记点之间的距离，并用签字笔记录下数据。依照此方法依次测量每个培养基菌丝的生长距离并进行记录。

3　结果与分析

3.1　胡萝卜生长期间各时期污染数据的统计与分析

胡萝卜分别加入 20g、40g、60g、80g 和 100g 与对照感染数据统计情况，每1个有8个重复，如下：

表1　胡萝卜生长期间各时期污染数据的统计　单位：个

3.2　胡萝卜对杏鲍菇菌丝生长发育的影响

表2　胡萝卜含量梯度增加杏鲍菇菌丝生长情况　单位：cm

图1　胡萝卜含量梯度增加杏鲍菇菌丝生长情况

如表1、图1所示，培养基中胡萝卜对母种菌丝生长的影响，每1个含量设置8个重复。胡萝卜20g的时候，与CK相比，CK菌丝长势在12月30日之前明显发育比胡萝卜快，在12月30日差距不太明显，且菌丝洁白、浓密、长势良好，边缘整齐无感染；胡萝卜40g时，与CK长势相比，CK菌丝长势依然比胡萝卜快，但相较于胡萝卜20g时，差距有所减小，且菌丝浓白，长势良好，但出现一个感染；胡萝卜60g时，与40g基本相似，但出现2个感染；胡萝卜含量在80g时，菌丝长势好于CK，且菌丝浓白，长势强，边缘整齐，出现感染2个；胡萝卜含量在100g时，菌丝长势与CK基本重合，且感染率加大，出现3个感染。由此得出：胡萝卜菌丝长势由大到小排列为80g＞100g＞CK＞60g＞40g＞20g，其感染情况由多到少为100g＞80g=60g＞40g＞20g。综合菌丝生长速度和菌丝长势可以看出,杏鲍菇原种菌丝生长最适是胡萝卜含量80g最为适宜。说明低浓度含量的加入不能满足杏鲍菇对营养的需求，所以，没有CK长得快，但随着含量的加大，其整体生长呈现优势，超越CK生长势，但当达到一定值时，生长优势又呈现下滑趋势，虽然没有低于CK，但基本持平。综上所述，胡萝卜含量在80g最适宜杏鲍菇生长。

3.3　香菇根生长期间各时期污染数据的统计与分析

从表3可知：香菇根感染率高，同时，必须做好酒精消毒，同样，含量低不易感染，含量高易感染。实验情况感染率高，意味着生产使用中更容易感染。香菇根感染以青霉、绿霉、细菌为主，有的甚至3种情况都有。

3.4　香菇根对杏鲍菇生长发育的影响

表3　香菇根生长期间各时期污染数据的统计　单位：个

培养基中添加不同香菇根含量对母种菌丝的影响，每1个含量设置8个重复。香菇根含量在20g时，其长势进度略低于CK，菌丝洁白、浓密、长势良好，出现1个感染；香菇根含量在40g时，香菇根长势明显低于CK，但菌丝洁白、边缘整齐，最终出现3个感染；香菇根含量在60g时，香菇根长势虽然没有CK长势好，

表4　香菇根含量梯度增加杏鲍菇菌丝生长情况　单位：cm

但是，相较于香菇根含量在40g时，长势较好，出现3个感染；香菇根含量在80g时，香菇根长势依旧没有CK长势好，但菌丝洁白、浓密、长势良好、边缘整齐，出现3个感染；香菇根含量在100g时，香菇根长势相较于香菇根含量80g时，差距有所缩小，但感染数量达到5个。由此得出:香菇根菌丝长势由大到小排列为CK＞20g＞100g＞80g＞60g＞40g，其感染情况由多到少为：100g＞80g=60g=40g＞20g。综合菌丝生长速度和菌丝长势可以看出,杏鲍菇原种菌丝生长最适为对照CK。香菇根加入基础培养基中，其整体生长情况长势不如CK，但随着含量的增大，其差距逐渐缩小，但其感染率却增加了。所以，继续增加其含量，不能采用。

4　小结与讨论

4.1　胡萝卜、香菇根含量越大越容易感染

试验结果表明，香菇根不适于采用，其感染率高，并且长势无CK长势好；胡萝卜含量在80g最适于杏鲍菇生长，且长势比CK好，感染率低，而胡萝卜相较于香菇根长势快，提前3d长满培养皿。

实践表明，杏鲍菇生长对培养基配方的要求比较严格，对不同材料、含量要求各不相同，而且菌丝生长速度快长势好，并不一定获得高产，但菌丝生长良好是食用菌获得高产的基础。所以，必须考虑其长势及感染率。期间，对杏鲍菇母种菌丝的管理极为关键，能及时发现不正常现象，及时处理。

4.2　胡萝卜80g对杏鲍菇菌丝生长优势明显

胡萝卜菌丝长势由大到小排列为80g＞100g＞CK＞60g＞40g＞20g，综合菌丝生长速度和菌丝长势可以看出,杏鲍菇原种菌丝生长最适为胡萝卜含量为80g最为适宜。说明低浓度含量的加入不能满足杏鲍菇对营养的需求，所以没有CK长的快，但随着含量的加大，其整体生长呈现优势，超越CK生长势，但当达到一定值时，生长优势又呈现下滑趋势，虽然没有低于CK，但基本持平。说明含量达到饱和，综上所述，胡萝卜含量在80g最适宜杏鲍菇生长。