猪胎盘中生物活性肽的制备及含量测定
2018-07-04张尚卫黄大鹏
动物医学进展 2018年6期
张尚卫,黄大鹏
(黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆 163319)
胎盘肽(placental polypeptide,PP)又称胎盘免疫调节肽、胎盘转移因子,是从动物胎盘中分离提纯得到的由核苷酸、肽类、和各种氨基酸等小分子物质混合而成的多肽。研究发现[1]胎盘肽具有抗菌抗氧化、提高机体免疫力等多种生物活性功能,它不仅能够促进T淋巴细胞E受体表达,还能促进淋巴细胞有丝分裂,从而增强细胞免疫。采用超声波破碎[2]、酶解[3]、组织匀浆[4]等方法,均能从鲜活胎盘中释放并提取出胎盘肽,胎盘组织中细胞壁的破碎以及固液分离程度对胎盘肽的提取效率有较大影响,不同的提取工艺对不同动物胎盘中胎盘肽的提取效率也不尽相同。目前我国基础母猪存栏大约3 500万头,每年可产出大量猪胎盘。研究猪胎盘内含有的活性物质,对合理利用数量庞大的猪胎盘资源具有重要意义。本试验用组织匀浆法提取猪胎盘肽,采用Tricine-SDS-PAGE 电泳法和考马斯亮蓝 G-250法对猪胎盘肽分子量大小和含量进行测定,为猪胎盘的进一步研究提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料
猪鲜活胎盘由大庆市龙凤区某养殖场提供;丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺为天津市科密欧化学试剂有限公司产品;溴芬兰、巯基乙醇均为北京科昊达生物技术公司产品 ;冰醋酸、尿素、甘油为国药集团化学试剂有限公司产品;三羟甲基氨基甘氨酸(ttricine)、十二烷基磺酸钠(SDS)为Biomo公司产品;Tris碱、TEMED为上海化学试剂公司产品 ;过硫酸铵(AP)为BIB产品 ;超低分子蛋白marker为北京索莱宝公司产品;……
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