王珊珊，李树东，刘欢欢，高国强，侯喜林

(黑龙江八一农垦大学动物科技学院 动物传染病诊断与新型疫苗实验室，黑龙江大庆 163319)

鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)引起的一种急性高度接触性传染病[1]，主要影响产蛋鸡和肉鸡，可导致蛋鸡产蛋量和蛋品质下降，肉鸡死亡率增加和生长性能下降，每年都给养禽业造成严重的经济损失[2-5]。

IBV编码的S蛋白是由S1和S2两个亚单位组成，S1蛋白是IBV的主要免疫原蛋白，它能够介导病毒与细胞融合，刺激机体产生病毒中和抗体和血凝抑制抗体，且在各血清型之间具有交叉反应[6-7]。S1蛋白也是IBV蛋白中变异程度最大的结构蛋白，某些重要氨基酸改变导致抗原决定簇的改变，从而产生新的变异株[8]。不断出现的新的变异株给传染性支气管炎的诊断和防治带来了困难，这也是研究IB疫苗的难点，S1蛋白为疫苗候选抗原，是IBV基因工程疫苗研究的热点。许多学者从腺病毒、马铃薯、杆状病毒等真核表达系统成功表达了S1亚单位蛋白[9-11]，但真核表达系统表达的蛋白量少，不利于目的蛋白的纯化和大量获取。李春萍等[12]用原核表达系统成功表达了S1基因中保守性较好的一段抗原表位区域蛋白,获得了重组蛋白，并成功制备了S1蛋白的单克隆抗体。表明S1蛋白某些抗原表位的原核表达产物具有较好的免疫原性。本实验选取S1基因中一段抗原表位区域蛋白，成功构建pQE-30-S1原核表达系统，获得了大量的具有较好反应原性的重组蛋白，可以获得大量的重组蛋白，为建立ELISA方法、制备单克隆抗体和后续开发IBV基因工程亚单位疫苗奠定了基础。……