甲状腺素对大鼠心肌T型钙通道蛋白和mRNA的影响*
2018-07-02傅润熹杨若松黄雪琴何文明余莜燕韦登明
傅润熹,杨若松,黄雪琴,何文明,余莜燕,韦登明
(宁波大学医学院病理学系, 浙江 宁波 315211)
甲状腺功能亢进性心脏病(hyperthyroid heart disease,HHD)是由于过量分泌的甲状腺素对心脏产生直接或间接毒性而引起的心脏疾病,心肌肥大和心律失常是其主要临床表现[1-2]。细胞内 Ca2+平衡对维持正常心律起到关键作用,目前发现心脏中主要有两大类Ca2+通道,一类是高电压激活的L型Ca2+通道,另一类是低电压激活的T型Ca2+通道。T 型钙通道分为Cav3.1、Cav3.2和Cav3.3,其阈值为-70~-60 mV[3],在起搏细胞去极化和自律性中起到了关键的作用。T 型钙通道在胚胎期广泛分布于心脏各部位,成年后只在传导细胞中表达,心室肌中表达很少,但在病理状态下,例如急性心肌梗塞、升主动脉缩窄、严重缺氧和充血性心力衰竭状况下发现在心室肌中T型钙通道重新表达[4-6]。目前国内外尚未见HHD所致心律失常是否与心室肌细胞T型钙通道表达变化有关的研究报道。本研究在建立HHD大鼠模型基础上,检测心电图和心肌细胞T型钙通道Cav3.1、Cav3.2和Cav3.3的表达变化,旨在探讨T型钙通道表达变化与HHD心律失常发生的关系。
材 料 和 方 法
1 实验材料
健康清洁级SD大鼠20只由宁波大学实验动物中心代购于浙江省动物中心,合格证号No.0102016,体重(200±10) g,雄性。按随机数字表法分为正常对照(normal control)组和HHD组,每组10只。兔抗鼠Cav3.1和Cav3.2多克隆抗体(上海生物工程股份有限公司);兔抗鼠Cav3.3多克隆抗体(Abbkine);L-甲状腺素粉剂和羧甲基纤维素钠(Sigma);山羊抗兔 II 抗(中杉金桥有限公司);RNAfixer常温无液氮RNA样品储存液和高纯总RNA快速提取试剂盒(百泰克生物技术有限公司);……
