周媛 ，朱萌 ，李志赛 ，曲伟杰 ，代飞燕 ，2，肖啸 ，2

（1.云南农业大学动物医学院，云南 昆明 650201；2.云南农业大学动物医院，云南 昆明 650031）

小反刍兽疫是小反刍兽疫病毒引起的一种急性高度接触性传染病，主要感染小反刍动物，绵羊和山羊随着年龄的增长感染率增高，幼畜发病后死亡率极高。该病为烈性传染病，已被国际动物卫生组织（OIE）列为A类动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。

羊支原体性肺炎是由丝状支原体山羊亚种、绵羊肺炎支原体和山羊支原体山羊亚种等支原体引起的高度接触性传染病。病羊临床特征为体温升高、咳嗽、呼吸急促，怀孕母羊感染该病会发生流产。小反刍兽疫和支原体性肺炎在羊发生应激、免疫力下降时，可引起继发、混合感染，导致病情复杂、免疫失败及羊的死亡率明显上升等。

小反刍兽疫和支原体肺炎可采用RT-PCR检测方法检测。

1 材料

1.1 试验样品 某羊场的送检绵羊一只。

1.2 临床症状 送检绵羊食欲、精神不振，被毛无光泽，高热，呼吸困难，流清亮鼻液，口内、齿龈出现红色溃疡，伴发腹泻，最后死亡。

1.3 病理解剖 患羊气管和支气管充血、出血，有大量瘀血块；肺与胸部粘连，呈纤维素性坏死，部分发生肝变，肺小叶间质增宽；瘤胃出血，肠管出血严重；脾脏边缘肿大，内部出血；心包积液，肾脏肿大，表面有出血点。

2 实验

采集病死绵羊病料（肺脏1份，鼻腔棉拭纸3份，心脏1份，脾脏1份，血液1份）。经模板提取、体系扩增、琼脂凝胶电泳后，对观察到的阳性结果进行统计和分析。

图1 小反刍兽疫PCR检测结果

2.1 小反刍兽疫PCR检测结果 从图1可以看出，从右往左，一个marker，一个阴性对照，一个阳性对照，五份样品（按数字顺序依次是心脏，肺，脾及两份鼻腔分泌物）。阳性对照基因片段为351bp，其中肺脏和鼻腔分泌物呈阳性。

2.2 支原体检测结果 从图2可以看出，两个marker，两个对照（其中一个阳性，一个阴性），三个样品（按数字顺序依次为肺，血液，鼻腔分泌物）。阳性对照基因片段为500bp，其中肺和鼻腔分泌物呈阳性。

图2 支原体PCR检测结果

3 诊断

结合临床症状、病理变化、实验室诊断，确诊本例绵羊为小反刍兽疫和支原体混合感染。