杨磊， 郑金旭， 史小东， 钱海， 孙金玲

(1. 江苏大学附属医院呼吸内科， 江苏 镇江 212001； 2. 江苏大学医学院， 江苏 镇江 212013)

肺动脉高压是多因素所致的一种病理生理状态，包含5种临床亚组，其预后不良。慢性低氧所致肺动脉高压(hypoxia-induced pulmonary hypertension，HPH)是肺动脉高压中最常见的亚组之一，其发病机制与肺动脉中层平滑肌细胞异常增殖引起的肺血管重塑有关[1]。研究揭示，HIF-2α、Wnt、TGF和MAPKs等多种信号通路参与肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells, PASMC)增殖和肺血管重塑，但针对HPH仍缺乏有效的治疗药物[2-5]。近来文献报道mTOR信号途径也与PASMC增殖有关，慢性低氧启动mTOR活化，通过磷酸化激活下游关键调节因子eIF2α，进一步增加c-myc表达，从而促进血管平滑肌细胞过度增殖[6]。

丹参酮ⅡA磺酸钠(sodium tanshinone ⅡA sulfonate，STS)是丹参酮ⅡA的水溶性衍生物，是中药丹参的主要有效成分之一。研究提示STS可改善肺血管重塑，降低肺动脉压力，从而治疗慢性低氧肺动脉高压模型大鼠[7]。也有临床研究结果表明，STS可改善肺动脉高压患者的临床症状，降低肺动脉压力[8]，但其具体作用机制尚未明确。故本研究通过建立PASMC缺氧模型并予STS干预，检测细胞内mTOR和eIF2α蛋白的表达，观察其对低氧诱导的大鼠PASMC增殖的影响，进一步探讨STS治疗肺动脉高压的可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料

大鼠PASMC购于赛齐(上海)生物工程有限公司(货号CBR130556)；STS冻干粉(成都瑞芬思生物科技有限公司)；雷帕霉素(RAM)，CCK-8试剂盒(上海生工生物工程有限公司)；mTOR抗体、p-mTOR抗体及c-myc抗体(美国Cell Signaling Technology)；eIF2α抗体、p-eIF2α抗体(英国Abcam公司)；β-肌动蛋白抗体(北京博奥森生物技术有限公司)；蛋白裂解液及蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟(上海博彩生物公司)；……