王梓桐 林海

摘 要：云芝免疫调节多糖是云芝中生物调节活性突出的一类物质。本实验是根据前人研究的基础上参考真菌活性的提取工艺，分析液氮和机械破碎对云芝多糖的影响，选取出提取云芝多糖的最佳工艺。结果表明，在液氮研磨的条件下80℃时200目是最佳的工艺条件。

关键词：云芝 液氮 多糖 蛋白

中图分类号：G63 文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2018）01（a）-0245-02

云芝的药效成分有多种，云芝活性物质有免疫调节蛋白和多糖，目前云芝蛋白和多糖有很多种提取方法，一般的方法常先用水提醇沉获得粗提物，然后在此基础上采用酶解、微波、超声波，膜处理和机械粉碎等方法进行辅助提取或精制[1-2]。本实验通过液氮研磨和机械粉碎两种方式对云芝子实体进行处理，并在不同目数和不同温度条件下用水提法提取多糖进行初步研究。

1 实验材料

云芝实体、液氮，苯酚、浓硫酸、甲醇、磷酸。

筛子：40目筛，100目筛，200目筛（浙江上虞市道墟仪器筛具产）。

2 实验方法

取一定量云芝实体两份，50℃烘干后分成两份。一份粉碎机处理。另一份液氮研磨至粉末状。然后分別过40目筛、100目筛和200目筛。

取上述制备的两种粉末各5g，分别加入200mL双蒸水，37℃、80℃条件下提取3h，每隔15min取1.5mL反应液。离心后取上清待测；在100℃条件下，提取3次每次60min，每次加水150mL离心合并上清。定容至500mL，每次取样1.5mL待测。

标准曲线的绘制：称取于50mg葡萄糖，加水溶解得1mg/mL的对照品溶液。精密量取1mL，2mL，3mL，4mL，5mL于50mL容量瓶定容、摇匀。分别精密吸取以上对照品溶液1.0mL，加5%苯酚试液0.5mL，摇匀，迅速加浓硫酸2.5mL，振摇2min。……