李文丽 余 鹃 向军俭 王 宏

(暨南大学生命科学技术学院生物工程学系,广州 510632)

《中国心血管病报告2016》报告，占城乡居民总死亡原因首位的是心血管病，其中农村为45.01%，城市为42.61%。急性心肌梗死(Acute myocardial infarction,AMI)是冠心病的一种类型，随着我国社会发展，饮食结构的改变，生活节奏加快，急性心肌梗死已经呈现逐年上升的趋势，发病越来越年轻化，并且男性发生的概率高于女性[1]。

现代医学上检测急性心肌梗死有三个标准，缺血性胸痛病史、心电图特征性改变和血清中心肌标志物浓度的变化[2]。由于心肌肌钙蛋白I(human cardiac troponin I ，cTnⅠ)在心肌受损时才在血液中出现，并且出现时间早，持续时间久，特异性强(持续时间>96 h)，因此国际临床化学联盟(IFCC)、美国临床生化学会(NACB)和中华医学检验分会等权威机构已将cTnⅠ作为AMI诊断的“金标准”[3，4]。

心肌肌钙蛋白Ⅰ、心肌肌钙蛋白T和心肌肌钙蛋白C三者形成三聚体复合物[5]。研究发现，当心肌发生损伤，外周血中90%的cTnⅠ以cTnⅠ-C或cTnⅠ-T-C复合物存在，单体形式存在较少[6]。因此建立能够检测以不同形式存在的cTnⅠ的检测方法是必要的。本研究在前期成功获得2株识别不同cTnⅠ表位的基础上，建立可以检测以cTnⅠ单体、cTnⅠ-C和cTnⅠ-T-C复合物形式存在的cTnⅠ的鲁米诺化学发光酶免疫分析法，具有更高的实用性。

1 材料与方法

1.1实验材料 人源的cTnⅠ-T-C抗原购自芬兰Hytest公司；雌性BALB/c小鼠：6周龄，清洁级，购自南方医科大学实验动物中心；cTnⅠ、cTnⅠ-C本实验室表达；弗氏不完全佐剂购自Sigma公司；胎牛血清、RPMI1640培养基购自Gibco；HRP标记羊抗鼠IgG二抗购自KPL公司；HRP标记试剂盒(A型)购自北京泰天河生物技术有限公司；B……