西葫芦细菌性茎基软腐病病原的分离与鉴定
2018-05-21董海龙王建明山西农业大学农学院山西太谷030801
董海龙,王建明(山西农业大学 农学院,山西 太谷 030801)
2012-2016年,作者在山西省晋中市榆次区、太谷县、大同市灵丘县、运城市芮城县等地调查发现温室蔬菜西葫芦瓜根茎基部产生一种病害,症状与中国胡秀芳等报道的半夏细菌性软腐病[1]和中国高必达等报道的朝鲜蓟细菌性根茎腐烂病[2]、马来西亚E. Nazerian et al.报道的卷心菜软腐病[3]、韩国OKHEE CHOI et al.报道的辣椒根茎软腐病[4]、韩国Jeong Ho Kim et al.报道的仙人掌软腐病[5]、伊朗ESMAEIL MAHMOUD报道花贝母软腐病[6]相似。该病害与李林在山东省12个县区报道的西葫芦软腐病病症相似[7],可导致温室西葫芦茎基部腐烂,整株枯萎死亡,尤其在重茬3年以上的温室内,发病率为40%~60%,严重影响温室西葫芦种植。本研究利用形态鉴定结合分子生物学技术,明确该病病原,以便为生产提供防治依据,现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 病情调察
2012-2013年,温室蔬菜西葫芦生长季节,在山西省晋中市榆次区、太谷县等茎基部腐烂的发生严重的地块进行病情调查,并定期系统观察此病害的发生危害情况,详细记载每个时期症状及发病率。
1.2 病原的分离及纯化
自榆次区上戈村、太谷县郝村温室内采集罹病植株,病原菌分离与纯化参照方中达植病研究法方法进行[8]。将经过表面消毒病组织研碎后移植到灭菌培养皿中,利用NA培养基适温培养病组织。
1.3 病原菌的致病性测定与重新分离
1.3.1 沾根浸泡法
选取长度为15~20 cm,具有4片针叶的健康无病西葫芦苗,移栽营养钵之前,在稀释的106CFU·mL-1的菌液中沾根浸泡1 min,后移栽直径为10 cm的营养钵中,浇水保湿恒温培养,对照组分别在无菌液的NA液体培养基中沾根浸泡1 min,恒温保湿培养[9]。……