卢延旭 王飞虎 王 鹏 解 勋 王军威

（1 中国刑事警察学院法医学系 辽宁 沈阳 110035；2 桦甸市公安司法鉴定中心 吉林 吉林 132400）

1 引言

头孢类抗生素是目前临床上应用最广泛的抗生素类药物之一，有关该类药物严重不良反应的报告数量也连续两年排名首位[1]，其中最严重的不良反应是过敏性休克[2]。已有研究资料表明：头孢类药物的降解产物R1侧链为过敏反应的半抗原，其与蛋白结合形成完全抗原，引起严重的过敏性休克。据此，本研究成功建立了豚鼠头孢类药物过敏死亡模型，同时选取了I型变态反应中比较特异的类糜蛋白酶、类胰蛋白酶和TNF-α三项免疫学学指标，采用ELISA法和免疫组织化学的方法，考察了该3项指标在过敏死亡豚鼠死后0～72h内血清和组织中的水平或表达，为头孢类药物过敏死亡的法医学鉴定提供参考性诊断指标。

2 材料与方法

2.1 试剂与仪器

实验试剂：注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠（哈药集团制药总厂，产品批号：A1502202-2）；牛血清白蛋白；PBS缓冲液；类胰蛋白酶、类糜蛋白酶、TNF-α ELISA试剂盒（上海朗顿生物技术有限公司）；类糜蛋白酶一抗、SP试剂盒（博奥森生物技术有限公司）。

实验仪器：BIO-RAD MODEL 550酶标仪；LeicaAperioAT2高通量快速玻片扫描仪。

2.2 方法

2.2.1 豚鼠过敏死亡模型的建立

分组：健康清洁级远交系雄性豚鼠120只，体重在150～200g（由辽宁长生生物技术有限公司提供）。将上述120只健康豚鼠，随机分为2组，磷酸盐缓冲液（PBS）对照组40只、头孢菌素过敏死亡（实验）组80只。每组按时间点分4小组：死后即刻（0h）组、死后24h组、死后48h组和死后72h组，其中对照组每个时间点10只，实验组每个时间点20只。……