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HPLC法检测黑曲霉发酵液中5-羟甲基糠醛的研究

2018-04-23吉玉玉陈家祥

中国酿造 2018年3期
关键词:标准实验

张 素,吉玉玉,肖 洋,陈家祥,徐 策,李 祝*

(1.贵州省烟草公司毕节市公司,贵州 毕节 551700;2.贵州大学 生命科学学院,贵州 贵阳 550025;3.贵州省产品质量检验检测院,贵州 贵阳 550003)

5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethyl-furfural,5-HMF),也称5-羟甲基-2-呋喃甲醛,是葡萄糖、果糖等单糖化合物在高温或弱酸等条件下脱水产生的醛类化合物[1-2],其分子中含有活泼基团醛基和羟甲基,可作为许多化学品的反应中间体,有望成为新的平台化合物[3]。目前5-羟甲基糠醛的制备方法主要是生物质水解法[4],还可通过降解植物纤维素制备[5]。于能江[6]从头孢霉属(Cephalosporium sp.)GH10的发酵物中分离鉴定出5-HMF,陈楠等[7]以蜜环菌发酵液为原料优化5-HMF的提取工艺皆能证明微生物发酵液产5-HMF,但都未对其含量进行精确的测定。国内外针对牛乳、果汁、蜂蜜、谷类食物、酒类和药物中5-HMF的检测方法进行了大量的报道,主要包括紫外分光光度法[8]、衍生化分光光度法[9]、高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法等[10-11]。紫外分光光度应用在乳制品中,由于含有多种蛋白质等成分会对分析结果有影响;衍生化分光光度法需先生成衍生化产物后再进行测定,耗时较长且操作较繁琐[12]。高效液相色谱法因具有样品用量少、方法操作简单并且能够准确对单一组分进行定性和定量等优点而被广泛使用[11]。本实验以黑曲霉(Aspergillus niger)发酵液为原料,以灭菌后的马铃薯葡萄糖琼脂(potato dextrose agar,PDA)培养基为空白对照,用高效液相色谱法对5-HMF含量进行测定,对于探索黑曲霉发酵液中存在物质具有一定的参考作用。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

1.1.1 菌株

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