潘 露 胡丽华 陶亦帆 杨 波

甲真菌病由真菌侵犯甲板所致，是皮肤科常见的浅部真菌病之一。近年来，随着生活水平的不断提高，广谱抗生素的滥用、免疫抑制剂及糖皮质激素使用的增多、甲真菌病的发病率呈上升趋势，致病菌种分布也发生变化，且菌种分布存在一定的地域差异。为了解浙北地区甲真菌病致病菌种分布特征，本研究对2016年1～12月来我院就诊的甲真菌病病人的真菌培养结果进行分析，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 病例及标本来源 所有病例均是2016年1～12月来我院就诊的临床初诊为甲真菌病患者，其中1007例真菌镜检阳性的标本进行真菌培养，334例培养阳性,阳性率33.17%。平均年龄42.5岁。

主要试剂与仪器 试剂：含氯霉素(0.005 g/100 mL)和放线菌酮(0.05 g/100 mL)沙保罗氏琼脂(杭州滨和微生物试剂有限公司)，梅里埃(上海)生物制品有限公司生产的酵母菌鉴定培养基(CAN2),乳酸酚棉兰染液。

仪器：CX-31荧光显微镜(OLYMPUS),低温恒温培养箱(MIP-154)，海尔医用冷藏箱(HYC-68A)，力康生物安全柜(HFsafe-1200LC)，三洋高压蒸汽灭菌器(MLS-3750)。

1.2 方法

1.2.1 直接镜检 选择病变最严重的病甲作为靶甲， 取材前先用75%酒精棉拭彻底清洁后，用无菌钝手术刀刮取表层，采集病甲边缘下的较深层(贴近甲床)的甲屑置于载玻片上，用10% KOH溶解病甲屑制成片，在酒精灯火焰上微加热，直接在低倍镜下检查有无菌丝和孢子，初步判断致病菌。

1.2.2 真菌培养与菌种鉴定 将甲屑标本接种于含氯霉素和放线菌酮的沙保斜面培养基中(SCCA)，每管至少接种3点。25℃～28℃培养2周，隔1～2天观察生长情况，皮肤癣菌和非皮肤癣菌的鉴定根据菌落形态、培养基颜色变化和小培养的镜下结构，主要依据大分生孢子的特征进行菌种鉴定。……