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隐孢子虫(Cryptosporidium)是一种重要的人兽共患肠道原虫，其宿主范围十分广泛，可感染包括人类在内的哺乳动物、鸟类、爬行类、两栖类和鱼类等多种脊椎动物[1]。隐孢子虫多通过受污染的水源和食物等途径传播，由其感染可导致以腹泻为主要临床症状的人兽共患原虫病[2]。免疫功能健全的宿主感染本虫后，一般表现为自限性的短期急性腹泻；而免疫力低下、免疫功能缺陷或抑制者则通常表现为持久的水样腹泻，导致体液大量丢失而危及生命。该病已被确认为引起人腹泻的六大病因之一，并被世界卫生组织(WHO)和美国疾病预防控制中心(CDC)列入新发传染病[3-4]。隐孢子虫病的病原检测有形态学、免疫学和分子生物学等方法，最常用的是检测粪便样品中的隐孢子虫卵囊[5]。粪便学检测主要有染色法、漂浮法和沉淀法，这些方法具有操作简单、费用低等优点，但是常规粪检有敏感性低、漏检率高等缺点[6-7]且需要检测人员有一定的检测经验。免疫学检测方法主要有免疫荧光、免疫印迹、免疫磁珠分离、流式细胞仪和间接血凝试验等，因特异性高、敏感性强，便于批量检测等优点，被广泛应用于隐孢子虫病诊断中[8]。

本研究以兔抗微小隐孢子虫血清抗体(IgG)为捕获抗体，以鸡抗微小隐孢子虫卵黄抗体(IgY)为检测抗体，建立了双抗体夹心ELISA方法并进行初步应用，以期为微小隐孢子虫病的流行病学调查和诊断提供快速、简便的免疫学检测方法。

1　材料与方法

1.1样品及试验用抗体来源微小隐孢子虫卵囊由人工感染犊牛后纯化获得；……