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大鼠肝损伤过程中肝组织神经营养因子神经突蛋白水平变化及其意义研究

2018-03-22周涛朱美意周杰曹东欧阳军

中国全科医学 2018年6期
关键词:血清差异水平

周涛,朱美意,周杰,曹东,欧阳军

随着现代工业和交通业的迅猛发展,各类事故所致腹部闭合性损伤日渐增多,而腹部创伤中肝损伤较常见,占腹部创伤发生率>20%[1]。严重肝损伤的伤情复杂,并发症多,病死率为10%[2]。目前对肝损伤的研究主要集中在免疫性、化学性肝损伤,而对机械性肝损伤的研究相对较少。神经突蛋白(Neuritin)作为神经营养因子在多个器官表达,其在肝损伤及修复过程中的变化及作用尚未被研究。因此本研究建立大鼠肝损伤模型,采用免疫组化法观察肝损伤后不同时间点肝组织Neuritin水平,以初步探讨Neuritin在肝损伤修复过程中的作用。

1 材料与方法

1.1 主要试剂 Neuritin免疫组化一抗为多克隆山羊抗体(型号AF283),购于美国R&D公司,相应二抗(型号:PV-9003)购于北京中杉金桥生物技术有限公司,10%水合氯醛购于MERCK,肝素购于南京化学试剂股份有限公司。

1.2 仪器与设备 自制改良型BIM-IV生物撞击机购于第三军医大学;Sartorius电子天平(型号:PRACTUM124-1CN)购自深圳市盛美仪器有限公司;鼠板由本院实验室提供。

1.3 实验动物、分组及造模

1.3.1 实验动物、分组 清洁级SD大鼠126只,由新疆医科大学动物饲养中心〔许可证号XJZZQ(XK)200301〕提供,6周龄,雌雄不限,体质量(200±20)g。2015年11月—2016年11月,采用随机数字表法将SD大鼠分为空白组(42只)、非肝损伤组(42只)、肝损伤组(42只)。

1.3.2 造模 各组大鼠腹腔注射10%水合氯醛(3 ml/kg)麻醉,取仰卧位固定于鼠板。肝损伤组采用自制改良型BIM-IV生物撞击机建立肝损伤模型:将大鼠右侧腹部置于自制改良型BIM-IV生物撞击机打击头下,对其剑突与右肋弓夹角处行2次打击致肝脏钝性撞击破裂伤,肝损伤造模成功与否根据美国创伤外科协会(AAST)肝损伤分级标准[3]评判;……

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