药用植物大黄种子基因组DNA的提取方法研究
2018-03-19任海龙
山西农业科学 2018年3期
任海龙
(西藏大学医学院,西藏拉萨 850000)
大黄(Rheum L.)是蓼科多年生高大草本植物[1]。大黄是一种很常见的中药材[2],其功效与作用是很突出的[3]。大黄具有很强的抗感染作用、泻下作用、保肝作用、退热作用、治疗慢性肾衰竭等用途[4-5]。大黄对根癌土壤杆菌[6]和青霉孢子[7]具有明显的抑制作用。近年来,对于大黄化学成分的研究相对较多,南海江等[8]对大黄属植物的有效化学成分进行总结,研究发现,大黄属植物中有将近200种化学成分;廖华卫等[9]对大黄含片中的大黄酚进行了提取、分离和纯化方法的研究;龚云麒等[10]通过各种色谱方法从拉萨大黄乙醇提取物中分离的化合物经现代波谱技术进行了分别鉴定。刘喜纲等[11]对购于北京同仁堂大黄的总蒽醌的提取精制工艺进行了研究,找到了一种相对适合提取大黄总蒽醌的提取工艺。目前在分子方面研究相对比较少,程小丽等[12]对重庆产大黄总RNA提取方法进行了研究,获得了质量较高的总RNA样品。而对于DNA提取方面的研究甚少,若要详细了解其分子机理,最佳DNA的提取方法是必不可少的。
本研究用5种方法对大黄种子基因组DNA进行提取,旨在筛选出最适宜的提取方法,即得到高浓度、高纯度的DNA样品。
1 材料和方法
1.1 材料
大黄种子采于西藏山南琼结县(E91°40′,N29°1′),将大黄种子用中草药粉碎机粉碎,于4℃条件下保存备用。
1.2 方法
将处理保存后的大黄种子样品分别通过以下5种方法进行基因组DNA的提取。
1.2.1 传统CTAB法[13]称取大黄种子粉末50 mg,装入……
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