文晓飞　马庆庆

摘要 目的：探讨遵义地区苗族、仡佬族与汉族慢性乙型肝炎患者HBV基因型分布特点。方法：采用PCR-反向斑点杂交方法，对遵义地区的苗族、仡佬族与汉族慢性乙肝HBVDNA阳性患者165例进行HBV基因分型。结果：苗族、仡佬族各40例，80例患者的基因型分别为B型55例（68.7%），C型23例（28.8），BC混合型2例（2.5%）；汉族85例，基因型分别为B型57例（67.1%），C型25例（29.4%），Bc混合型3例（3.5%）。结论：HBV的3种基因型在遵义地区苗族、仡佬族与汉族中总体分布差异无统计学意义；两者B型都占有绝对优势；C型基因在乙肝肝硬化、肝癌中的发病率高于B型基因。

关键词 乙型肝炎病毒；基因型；苗族；仡佬族；汉族

慢性乙型肝炎感染者伴有乙肝病毒活动性复制是发展成为进展性肝病（如肝硬化、肝癌）的重要相关因素。本试验采用荧光PCR法检测乙型肝炎病毒基因型，以了解遵义地区苗族、仡佬族与汉族HBV基因型分布情况，以及HBV基因型与临床的关系。

资料与方法

2015年4月-2017年4月采集贵州航天医院门诊和住院慢性乙肝患者，成功进行基因分型165例。其中苗族、仡佬族各40例，合计80例；男64例，年龄13～75岁，平均（40.6±13.7）岁；女16例，年龄15～66岁，平均（39.4±12.8）岁。汉族85例，男67例，年龄16～76岁，平均（42.5±14.6）岁；女18例，年龄14～68岁，平均（41.7±13.2）。均符合《传染病学》慢性乙型肝炎诊断标准。

主要试剂及仪器：HBV核酸PCR，HBV基因分型亚能生物技术（深圳）有限公司PCR和DNA反向点杂交。

检测方法：乙肝5项检测、HBV标记物检测，严格采用化学发光微粒子免疫分析技术进行操作。①HBV基因分型采用PCR和DNA反向点杂交：设计特异的PCR引物扩增获得HBV基因片段，该片段包含了所要检测的基因型。通过PCR产物与设计的探针进行特异性杂交，根据膜条特定位置显色（蓝色1与否来判断HBV的基因型。②基因分型结果判读：本试剂以显色与否来进行判断，基因分型阵列位点HBV-B显色，表明感染B基因型；以此类推为感染c基因型、D基因型；上述阵列位点≥2个显色，表明混合感染对应的基因型。

统计学方法：所有数据采用SPSS 17.0软件处理，P<0.05为差异有统计学意义。

结果

HBV分型结果：共获得分型结果165例。在165标本中，分别统计苗族、仡佬族与汉族男、女性各基因型，结果表明：B型、C型、BC混合型，无论在苗族、仡佬族与汉族中，男性所占比例均高于女性，两者基因型在性别上差异无统计学意义（P>0.05）。将所检测的患者年龄划分为<30岁、30～50岁和>50岁3个时段，在165例标本中，在<30岁的年龄段中，39例标本中B型所占比例27/39；在30～50岁的年龄段中，89例标本中B型所占比例60/89；>50岁的年龄段中，37例标本中B型所占比例25/37。无论处于哪个年龄段，HBV基因分型均为B型居多。不同年龄段少数民族、汉族HBV各基因型分布情况中，发现年龄段在两者间的分别比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

遵义地区乙肝病毒感染者的HBV基因型与临床疾病谱的关联性：随着疾病的发展，B型和C型在慢性肝炎乙型肝炎与乙肝肝硬化两疾病间比较，差异有统计学意义（x²=4.850，P=0.028<0.05）；B型和C型在慢性乙型肝炎与原发性肝癌两疾病间比较，差异有统计学意义（x²=3.954，P=0.047<0.05），表2。

讨论

慢性乙型肝炎是我國危害最严重的一种传染性疾病，全球因感染HBV导致肝衰、肝硬化、肝癌及并发症而死亡的总人数高达57.6%。因此对HBV基因的研究显得非常重要。HBV基因分为A、B、C、D、E、F、G、H、I等9个基因型。同一基因型又被进一步分为不同的亚型。

本研究在165例HBV感染人群中，HBV基因分型以B基因型占多数，C基因型次之，同时有部分B基因型和c基因型混合感染，与丁静娟等研究贵州地区HBV基因型由B、C2型构成，且以B基因型为主，苗族患者中B型占绝对优势的基因型相符合。成功分型165例HBV感染者样本中，苗族、仡佬族各40例，合计80例。通过对不同性别、不同年龄组HBV感染者的基因型比较，显示差异无统计学意义（P>0.05），表明性别、年龄与基因型无相关性。随着疾病的发展，C基因型在肝硬化和原发性肝癌中所占比例增加，c型有49例，其中乙型肝炎30例（61.2%），乙肝肝硬化14例（28.6%），原发性肝癌5例（10.2%），与B型差异有统计学意义（P<0.05）。目前普遍认为C型引起的炎性坏死及纤维化程度比B型更加严重，且C型与肝硬化和肝癌的关系更为密切，基因型c的累积生存率明显低于B型。

贵州遵义地区苗族、仡佬族自古以来就是一个不断向西大迁徙、进入云贵高原的民族，交通的改善、与汉族之间的文化交流、生活习惯的改变，与汉族通婚，使不同源人群在相同环境条件下，可以朝相同方向演化而形成趋同的体质特征。本研究对贵州遵义地区少数民族病毒基因型的分布及特点做研究，为遵义地区根据不同基因型、不同年龄段采取不同的乙肝防治策略措施提供了依据。endprint