孙国海 汪珣 朱来晴 石亮

210008江苏省南京市南京大学医学院附属鼓楼医院男科实验室

随着社会发展及环境恶化，男性生育力逐渐下降，精液检查需求相应不断增加。因此，精液检查结果的可靠性、准确性显得尤为重要。随着计算机技术的发展，自动精液分析仪逐步应用于临床[1-2]。对于大部分精液标本来说，自动精液分析仪在精子密度、活力等方面的检测结果较传统手工法更客观、可靠，但是自动精液分析仪只可用于检测精子浓度＞2×106/mL的标本[3]。对于精子浓度远低于2×106/mL的标本，存在精子漏检甚至误诊为无精子症的可能。本实验室目前采用的全自动精子分析仪(Fully automated sperm analyzer，FASA)BEION-S3 同样会遇到这样的问题。本文中，我们所探讨对象，仅限于FASA全视野均未观测到精子从而怀疑为无精子症的精液标本，对这些标本进一步分析以确诊其是否是无精子症。

资料与方法

2018年1-9月收集男性精液标本，FASA检测为无精子症标本388例，受试者年龄18～55岁。

仪器与试剂：上海北昂医药科技股份有限公司的FASABEION-S3，Olympus CX23光学显微镜，Thermo Fisher scientific公司Micro CL 17离心机。

方法：嘱受试者禁欲2～7 d，手淫取精，标本于37℃孵育至完全液化后充分混匀，取2 μL于BEION-S3专用载玻片中，进行自动检测分析。对未检测出精子而提示无精子症的标本，取样50 μL均匀涂片后于高倍镜下逐个视野观察，记录前向运动PR精子数、非前向运动NP精子数及不动IM精子数。重复上述涂片步骤1次，记录2次结果之和为最终结果。如2次均未见精子，则取标本1 mL以3 000 r/min离心15 min，弃上清，将沉淀物混匀后，在两张玻片上各加入10 μL沉淀团悬液，覆盖22 mm×22 mm盖玻片，200倍镜下逐个视野观察，如前记录各类型精子数。

统计学处理：以Microsoft Excel 2013进行数据统计。

结 果

388例精液标本中，离心前镜检未观测到精子239例(61.60%)，其中离心后镜检发现精子10例(2.58%)；离心前镜检观测到精子成分149例(38.40%)。观测到的不同运动类型PR、NP、IM精子的标本例数具体结果，见表1。

讨 论

在精液常规分析中，传统手工法费时费力且易受检测者主观影响，因而近些年随着计算机技术的发展，精液自动分析系统逐步被市场接受。本实验室采用的FASA BEION-S3仅需2μL精液标本即可快速检测出精子密度、活力等常规参数，但对于精子密度极低的精液标本存在精子漏检及误诊为无精子症的可能。

无精子症是指射出的精液在离心后的沉淀物中未发现精子，根据不同病因可分为梗阻性无精子症和非梗阻性无精子症[4]。本实验室就诊的男性不育症尤其是少精子症、无精子症患者，多数于后期需进行辅助生育，如果精液标本中能够发现活动精子，尤其是PR精子，那么患者可能无须承受后期睾丸穿刺的痛苦，因此对怀疑无精子或少精子症标本需尽量确诊其有无精子及活动精子。在本研究中，388例经FASA分析初步怀疑无精子症标本，经过离心后镜检，确诊无精子症标本229例。但必须指出，3 000 r/min离心15 min并不能使精液中所有精子完全沉淀下来，且离心后精子可能丧失活力。离心后发现精子的10例标本，属于隐匿精子症，其中仅1例发现1条PR精子，另外9例均只检测到1～2条不动精子。对于149例可见不同运动类型精子的标本，因精子密度过低而无法准确测量密度，但通过对镜下检测到的精子尤其是活动精子进行计数，并在检测报告中给予备注，为临床医生提供了相对直观的精液指标，对临床判断不育症病因及后继治疗具有良好的指导意义。

表1 388例FASA检测出的无精子症标本进一步镜检结果[n(%)]

综上所述，对于FASA检测出的怀疑无精子症的精液标本，需进一步通过涂片镜检甚至离心后镜检的方法，确诊其有无精子及活动精子，从而得到相对可靠准确的精液检测结果。