刘兴华，倪俊卿，宋首宏，李建明，杨玉英

（河北省畜牧良种工作站，河北石家庄050000）

种公牛冷冻精液的质量优劣直接影响母牛的受胎率和繁殖率,也与养牛户的经济利益密切相关,所以时刻树立质量意识,对冷冻精液质量进行严格的控制尤为重要。河北品元畜禽育种有限公司作为全国大站,拥有优质种公牛200多头,生产的冷冻精液发往全国各地,多年来一直遵循确保每一支冻精优质合格,让每位养牛户用上放心冻精的原则，在生产过程中，形成一系列的质量控制措施，保证了冷冻精液的质量。

1　细菌数的控制

国标规定，每剂量的精液细菌数不能超过800个，在实际生产中，细菌数是最不好控制的指标，往往一个细节的疏忽，就造成最终细菌数的超标,尤其在炎热潮湿的夏季,细菌数控制更是重中之重,为此我们也做了大量的工作。

首先，精液采集及处理的大环境卫生无菌处理是非常必要的，而大环境主要就是精液处理室、采精厅、采精准备室。精液处理室及采精准备室需要定人定岗进行卫生打扫，保持室内的干净清洁，并且使用定时开关在每天下班后对室内进行紫外线照射30～60min消毒，而为了防止外来因素对环境造成的污染，精液处理室严禁非工作人员进入，工作人员必须首先在更衣室更换干净无菌鞋帽后进入走廊最后进入精液处理室，更衣室以及走廊也设有紫外线灯照射进行消毒；工作人员保证个人卫生，勤洗手不留指甲等等，有效的防止人为造成细菌污染；保持采精厅内的通风干燥，采精厅每次使用完毕后由专人进行清扫消毒，用水冲刷地面然后再泼洒消毒液，防止细菌的滋生。

第二个大的方面是精液采集处理过程中所使用的器具，由于这些器具跟精液有直接的接触，如果消毒不完全或者被污染，那么精液自然也就被污染，所以器具必须进行严格消毒。采精所用的假阴道、内胎、三角漏斗需经过三道清洗，首先使用清水冲刷后用洗洁精水进行二次清洗，最后再用清水冲洗，清洗干净后使用蒸汽消毒机进行蒸汽消毒，消毒后放在无菌的环境中备用，在安装时再使用75%酒精擦拭消毒。集精杯、锥形瓶、量筒等直接和精液接触的玻璃器皿在常规清洗后使用干燥箱120度消毒2h；包装用的塑料管、塑料细管及纱布袋都于前一天用紫外线消毒30min。所有器皿消毒后放于无菌环境中备用，防止污染。

第三方面就是精液采集和处理过程中的控制：无论是公牛和采精用的台牛都要做好牛体清洁消毒工作，要定期对公牛进行牛体刷拭以保证干净，尤其是牛体腹部的清洁，采精前对采精公牛阴茎周围阴毛进行修剪并清洗消毒，避免采精过程中身上污染物、微生物或者包皮中的污物进入精液。台牛每次使用前需用高锰酸钾溶液刷洗后躯并用干净毛巾擦拭干净，在采精过程中要保持台牛的干净状态，一旦后驱被牛粪污染需要立即清洗，同时定期剪除台牛尾巴上过长的尾毛，在采精过程中使用栓系尾巴的方法来避免台牛甩尾，这样可以有效的避免台牛身上污物和微生物落入假阴道污染精液；采精过程中采精员需佩戴一次性手套，防止细菌污染以及交叉感染的发生，假阴道润滑液定期消毒避免细菌的滋生。

精液采集后通过无菌传递窗送达精液处理室，在精液处理室进行活力检测使用的枪头应提前使用紫外线进行消毒，其他玻璃器皿全部进行高温消毒后使用。精液稀释所用稀释液需进行无菌处理，最好使用进口稀释液，避免自配稀释液使用卵黄，因无菌处理不到位而造成细菌数超标。

2　活力的控制

精液冷冻后由两人一组进行冻后活力的初次检测。检测方法是同时解冻两支混匀，用移液枪吸取7～8ul滴于载玻片上，盖上盖玻片置于37℃的载物台上 （载玻片盖玻片提前放置37℃载物台上预热）进行观察，每个镜片取三个视野进行活力检测，取其平均活力评价值作为最终结果，而两人一组的方法有效的避免了人为主观因素对活力的误判，减少误差的发生。初步检测合格精液放入储藏室等待质检人员进行质检，质检合格在进行分装后，对产品再一次进行抽检，经过这三次活力的检测确保精液活力合格。

3　有效精子数、剂量的控制

有效精子数由稀释仪、密度分析仪来进行分析，精密的仪器保证了每剂冻精中精子的总数，而严格把关活力则保证了每剂冻精中有效精子数。为确保仪器准确性，避免出现错误，生产人员需要每周对稀释仪、密度分析仪进行一次人工校对。校对需由两人进行，防止人为的误差。对灌装机每次使用完后进行严格的清洁以及保养，确保了剂量的合格。

4　畸形率的控制

畸形率表面上人为控制不了，但是从精子畸形的形态可以分析出某些原因，比如采精的频率，饲养水平等等，所以质检人员及时与生产管理人员沟通，根据每头牛精子的形态情况及时调整某些牛的采精频率以及营养水平。

在生产过程中,制定操作规程，要求操作人员严格按照操作规程进行操作，每一道工序责任落实到人，并且定期培训，监督，防止因为人员操作不当造成的质量问题。

5　质量检测控制

定期检测冻精的剂型、剂量、畸形率、有效精子数、细菌数、直线前进运动精子数，严格按照质量检测操作规程操作，质检所用仪器设备定期校对，自检。质检标准执行高于国家标准的企业标准，任何一项指标不合格，该产品即作废处理，不让一支不合格产品流入市场。检测过程做好原始记录，检测人员、复核人员、检测负责人签字，最后出具检测报告。同时在质量检测中使用精子分析系统进行辅助检测，检测结果出具详细的数据报告，质检结果更加客观准确，并且根据各项精子数据来随时做好种公牛的饲养管理工作。

细节决定成败，近几年来，严格控制生产中的每一个环节，确保了冻精质量，为牛品种改良和牛养殖户繁殖率提高提供了质量的保障。