猪流行性腹泻病毒诊断技术概述
2018-02-13
畜禽业 2018年5期
(山西省太谷县畜牧兽医中心 范村镇畜牧兽医站,山西 太谷 030800)
0 引言
猪流行性腹泻病毒(PEDV),冠状病毒科的冠状病毒属成员,1978年在欧洲被发现[1]。自从在欧洲初步分离以来,PEDV已经扩散到世界上几个主要的养猪产地,包括亚洲和北美洲。1982年该病毒首次在日本被发现,并逐渐蔓延到几个邻近国家,包括韩国、中国、泰国、中国台湾和越南。2013年,PEDV蔓延到北美,在美国最初被发现,随后扩散到加拿大和墨西哥[2]。在美国,PEDV侵入后迅速传播至全国,导致700多万头仔猪死亡(占该国猪群总数的10%)。PEDV是猪流行性腹泻(PED)的致病因子,能够引起急性,高度传染性的严重肠道疾病。所有年龄的动物都对PEDV易感[3]。然而,成年猪通常呈现较轻的症状,死亡率较低,低日龄的仔猪发病最为严重,会表现出严重的腹泻、呕吐,脱水而死,病死率极高。PEDV的严重致病性已对养猪业造成了不容小觑的经济损失,快速、准确的诊断病原尤为重要。
1 病毒分离
Vero细胞是使用最广泛的细胞系,可用于PEDV的分离和增殖[4]。PEDV的自我复制能诱导细胞出现典型的细胞病变效应(CPE),包括细胞融合,合胞体形成和细胞脱离。细胞培养过程中PEDV的复制取决于细胞培养基中外源性胰蛋白酶[5]。胰蛋白酶的蛋白水解活性导致S糖蛋白分解成为S1和S2亚基,增强病毒的感染性,促进其与细胞融合并在细胞中释放。因此,必须在培养基中加入外源性胰蛋白酶,用于增强细胞培养物PEDV的分离。
2 病毒中和试验(VN)
VN是利用PEDV的特异性抗体结合病毒,阻断病毒的复制周期,诱导病毒颗粒的凝集或裂解,降低PEDV的感染力。……
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