浅析蛋白芯片在兽药残留中的应用
2018-02-13
畜禽业 2018年5期
(佛山市顺德区北滘镇动物防疫检疫站, 广东 佛山 528311)
1 材料与方法
1.1 材料
(1)仪器与设备。芯片扫描仪,型号:晶芯EcoScan-100,厂家:北京博奥生物有限公司。离心机,型号:GL-20G-Ⅱ,厂家:上海安亭科学仪器厂。气相色谱-质谱联用仪,型号:TRACEDSQ,厂家:菲尼根。高效液相色谱仪,2695配紫外检测器型,厂家:Waters公司。
(2)试剂。ELISA检测试剂盒、克仑特罗残留检测试剂盒以及磺胺二甲基嘧啶残留检测试剂盒,这3种试剂盒均由r2Biopharm公司生产。蛋白芯片兽药残留检测试剂盒,则由北京博奥生物芯片有限公司生产。纯度为99.6%的克仑特罗和纯度为99.0%的链霉素的标准品,由中国药品生物制品检定所提供。纯度为99.0%的磺胺二甲基嘧啶标准品,由美国的SIGMA公司生产。纯度为100.1%的恩诺沙星标准品,由中国兽医药品监察所提供。
(3)实验用菌。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌株。
1.2 方法
(1)试剂盒的灵敏度评价。①芯片反应:按兽药残留蛋白芯片检测试剂盒说明书进行[1]。②标准曲线溶液的配制:依照实验要求,将各种药物标准品按步骤配制成标准溶液。③扫描及数据处理:芯片反应完毕,进行图像扫描和数据处理;依照校正后的荧光信号强度对各标准品溶液的药物浓度作标准曲线;求出每种待测药物的IC50(荧光信号强度下降一半的兽药浓度)值。
(2)试剂盒的特异性评价。①芯片反应:按兽药残留蛋白芯片检测试剂盒说明书进行。②标准曲线溶液的配制:依照实验要求,将各种药物标准品按步骤配制成标准溶液。③扫描及数据处理:同上,反应完毕后,进行图像的扫描以及相关数据的处理;……
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