王 涛 蔺海燕 刘 芳 张传森

(第二军医大学, 1 学员旅8队, 2 人体解剖学教研室， 上海 200433)

运动神经元病(motor neuron disease, MND)是一种由运动神经元慢性进行性变性导致的神经系统疾病,是临床常见病,主要影响运动功能,通常在3年内导致重大残疾或者死亡[1]。发病率较高的MND主要有肌萎缩性脊髓侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis, ALS)、进行性脊髓性肌萎缩(progressive spinal muscular atrophy, pSMA)和进行性延髓性麻痹(progressive bulbar palsy, PBP)。

PBP及原发性侧索硬化(primary lateral sclerosis, PLS)等[2,3],目前临床尚缺乏有效的治疗方法。对MND临床、病理生理和遗传异质性的不断探索促进了临床治疗方案的发展[4],干细胞移植替代变性的神经元是一种极具吸引力的治疗方案,是当前的研究热点[5]。

研究发现,移植的干细胞或神经前体细胞容易受到神经微环境的影响,在中枢神经系统非神经发生区及损伤区域主要分化为胶质细胞[8],同时神经前体细胞在损伤处的发育成熟也会受到阻碍[9]。因此目前通常将干细胞或神经前体细胞诱导分化为运动神经元后进行移植,但诱导方法存在耗时长、分化率低、获得的运动神经元不够成熟等问题。本文对目前成体干细胞诱导分化为运动神经元的方法进行综述,为自干细胞获取分化率高且成熟的运动神经元、耗时短的诱导分化办法提供参考。

1 羊膜间充质干细胞

人羊膜间充质干细胞由一组具有不同表型的细胞亚群组成,其中包含神经祖细胞亚群。胡炜等[10]将第3代人羊膜间充质干细胞用碱性成纤维细胞生长因子预诱导,然后以B27替代血清培养2d;当细胞在膜上接近40%融合时,撤去碱性成纤维细胞生长因子,加入维甲酸、神经生长因子,在膜样基质上进一步培养24h;撤去维甲酸,加入碱性成纤维细胞生长因子继续培养3d。……