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分离植物甘油酯的薄层层析色谱法的优化

2018-02-13陈亚东薛金嫚

江苏农业科学 2018年24期

陈亚东, 薛金嫚, 徐 婷, 刘 华, 雷 洁, 甘 毅

(1.浙江农林大学农业与食品科学学院,浙江临安 311300;2.浙江农林大学林业与生物技术学院,浙江临安 311300;3.南京农业大学农学院,江苏南京 210095)

脂类(lipids)是生物细胞膜的主要组成成分,在植物光合作用、细胞信号传导、逆境胁迫等生命活动中扮演着极其重要的角色[1-5]。从极性上分,脂类可分为极性脂和中性脂,前者包括单半乳糖二酰甘油(mono galactosyl diacyl glycerol,简称MGDG)、双半乳糖二酰甘油(di galactosyl diacyl glycerol,简称DGDG)、硫脂-硫代异鼠李糖二酰甘油(sulfo quinovosyl diacyl glycerol,简称SQDG)、磷脂酰甘油(phosphatidyl glycerol,简称PG)、磷脂酰胆碱(phosphatidyl choline,简称PC)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl ethanolamine,简称PE)、磷脂酰肌醇(phosphatidy linositol,简称PI)、磷脂酸(phosphatidic acid,简称PA)等,后者包括三酰基甘油(triacyl glycerol,简称TAG)、二酰基甘油(diacylglycerol,简称DAG)等。

长期以来,将各种甘油酯进行有效分离,是深入进行植物脂类代谢研究的前提条件。到目前为止,分离植物甘油酯的方法主要有薄层层析色谱分析(TLC)、柱层析色谱法、高效液相色谱(HPLC)等。TLC是一种快速、准确分离脂质的重要方法,它通过不同极性的脂类在固定相和展开相中的相对移动速率差异将脂质进行分离并显色,从而进行脂质含量和组分的测定。由于TLC方法具有快速、直观、操作简便和廉价的优点,所以在脂类代谢领域应用最为广泛,并且该种方法也广泛应用于检测酶的活性[6-8]。但是,TLC分离脂质的效果易受到外界环境条件的影响,如气温、湿度等。目前,常见的TLC分离分为单向和双向2类。单向分离溶剂系统常采用正己烷 ∶乙醚 ∶乙酸(体积比70 ∶30 ∶1)作为展开相,用于分离植物三酰基甘油(TAG)和极性脂[9]。也有一些研究采用丙酮 ∶甲苯 ∶水(体积比91 ∶30 ∶8)作为展开相,分离植物样本中的糖脂和磷脂[10]。……

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