余春林 杨朝武 邱莫寒 尹华东 虎 彪 胡陈明

（1.四川省畜牧科学研究院，四川成都 610066；2.动物遗传育种四川省重点实验室，四川成都 610066；3.四川农业大学动物科技学院，四川成都 611130；4.四川省正鑫农业科技有限公司，四川成都 610400）

禽白血病（AL）是由禽白血病病毒（ALV）引起的一种禽类传染病，临床上以免疫抑制、生长抑制以及多器官组织发生良性和恶性肿瘤等为主要特征，ALV既可垂直传播，也可以水平传播，严重危害家禽产业发展。当前，禽白血病的研究已成为动物医学的热点领域。然而，禽白血病的防控依然是阻碍产业发展的重大技术瓶颈，解决这个问题是科学研究和产业发展面临的共同挑战。

1 禽白血病概述

1.1 病原学特征 禽白血病病毒为反转录病毒，由外部囊膜和内部核芯组成。对热不稳定，在pH值为5～9时较稳定，乙醚、甲醛、脂溶剂可破坏其囊膜中的脂类，从而影响其感染性。十二烷基硫酸钠（SDS）等去污剂也可裂解病毒。

该病毒基因组为单股正链线性RNA二聚体，编码区为gag/pro、pol和env基因。gag/pro基因编码前体蛋白Pr76，该蛋白可加工成基质蛋白p19、衣壳蛋白p27（主要群特异性抗原）、核衣壳蛋白p12（参与RNA加工和包装）、蛋白酶p15（负责前体蛋白剪切）及部分多肽；pol基因是病毒基因组插入宿主细胞染色体基因组的关键，编码的前体蛋白经p15剪切产生反转录酶蛋白p68和整合酶蛋白p32；env基因与病毒抗原性、组织亲嗜性及毒力相关，是关键致肿瘤基因，其变异决定了ALV-J毒株的变异。

1.2 禽白血病不同亚群特征 根据病毒与宿主细胞特异性相关的囊膜蛋白的抗原性，ALV可分为A～K共11个亚群，其中A、B、C、D、E、J和K等7个亚群能感染鸡，其中致病性外源病毒以A、B、J、K为主，C、D亚群有致病性但很少见，E亚群为内源性病毒。

1.2.1 A/B亚群 鸡群中自然发生的白细胞增多症和肿瘤多由此亚群病毒所致。血清流行病学调查显示，全国约50%鸡群ALV-A/B抗体呈阳性，但很少有ALV-A/B诱发肿瘤的病例报告[1]。目前，相关毒株的分离鉴定主要是证明外源性ALV存在。

1.2.2 J亚群 鸡是ALV-J的自然宿主，一些野鸟也可感染[2]。ALV-J根据致瘤快慢，分为慢性和急性致肿瘤ALV-J。前者多为分离到的ALV-J野毒株，经几个月潜伏期才发生肿瘤；后者只需7 d或几周就能诱导肿瘤，如966[3]。自然病例中，急性白血病肿瘤较少见，刘绍琼等[4]从山东817肉杂鸡中发现1例肿瘤，分离后鉴定与ALV-J相关，并能在较短时间内复制。目前已证明急性致肿瘤ALV的整个pol基因及部分gag和env基因片段被fps肿瘤基因替代[5]。J亚群于20世纪90年代中期扩散至全世界所有品系白羽肉鸡，但经十多年对原种鸡群的净化，至2005年已基本实现净化。而我国ALV-J随引进鸡种在白羽肉鸡中大流行后，又扩散至蛋鸡、黄羽肉鸡培育品种及地方品种，流行严重。

1.2.3 K亚群 Li X等[6]2014年从我国地方鸡种中发现一个新的ALV-K毒株，且该病毒可能已长期存在于我国本地鸡中。其gag、pol和gp37基因与其他ALV亚群（尤其是ALV-E）具有高度相似性，gp85基因序列分析及进化分析显示其与ALV-K相似。与其他ALV毒株相比，该病毒株具有较低的复制力和致病力。

2 禽白血病流行病学特征

我国禽白血病流行情况形势严峻。1999-2005年，崔治中等[7]已分别从江苏、山东、河南、宁夏等省区分离到ALV-J。采用病毒分离技术对国外引入种鸡直接检疫，极大地加快了我国白羽肉鸡ALV-J净化进程。2006年后，全国范围内未见白羽肉鸡ALV-J肿瘤相关投诉与报道，但仍存在不同程度的ALV-J感染。ALV-J已传入我国其他类型鸡群。2005年，徐镔蕊等[8]在河北省某蛋鸡群发现典型骨髓细胞瘤病理，并通过免疫组化法证实了蛋鸡中ALV-J的存在。同时，我国地方鸡种中也普遍存在禽白血病流行。张桂枝等[9]对河南省地方品种泄殖腔拭子、蛋清、血清进行P27抗原检测，采集血清进行ALV-J、ALV-A/B亚群抗体检测，同时采集血液接种DF-1细胞进行外源ALV病毒分离，结果显示，泄殖腔拭子P27抗原检测阳性率为10.99%～23.55%，蛋清样本P27抗原阳性率为5.43%～12.32%，血液样本P27抗原检测阳性率为22.83%～26.63%，ALV-A/B抗体阳性率为18.48%～30.43%，ALV-J抗体阳性率为6.52%～17.39%，外源病毒分离阳性率为8.00%～13.04%。敖越[10]、王宏燕等[11]也分别报道了我国部分地区禽白血病的流行情况。

3 禽白血病诊断技术

禽白血病主要通过流行病学、临床症状和病理变化进行初步诊断，但确诊还需实验室通过病毒学、免疫学或分子生物学方法进行病毒分离鉴定。其中病毒分离与鉴定是禽白血病诊断最可靠的方法，多在DF1细胞或CEF细胞上进行。在核酸斑点杂交试验、酶联免疫吸附试验、免疫荧光技术、免疫组化技术等基础上，禽白血病检测技术发展迅速，已研究出多种基于上述技术的商品化试剂盒。此外，采用胶体金进行标记的免疫层析法研制的快速检测试纸条，具有快速、可操作性强、成本低的优点，但其灵敏度和准确性存在差异。

4 禽白血病综合防控技术

4.1 构建禽白血病防控系统 构建科学的疾病防控体系，落实有效的防控措施，是解决当前禽白血病威胁的突破口。禽白血病防控体系是一项系统工程，其核心是要做到引种、饲养、生物安全控制、疾病监测、孵化和出雏等环节的精细化管理。通过制定科学的入场检疫将病原引入洁净的群体，实施全进全出制；强化饲养管理制度，保障机体健康状况，减少水平传播；定期开展病原监测，掌握疾病感染状况；执行合理的免疫程序，确保疫苗无外源病毒污染。

4.2 推进禽白血病净化进程 种源疫病净化是防控该疾病的首要环节。1987年前后，国际大型育种公司已基本消除白羽肉鸡中A/B亚群禽白血病，2005年我国ALV-J也基本得到有效的控制。我国禽白血病感染情况普遍，净化工作亟待加强。2012年，国务院发布《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》提出将白血病作为种禽场重点疫病净化考核标准。2015年，农业部已认证了2个禽白血病净化示范场和5个禽白血病净化创建场。

疾病净化是一项长期持久的工作。目前禽白血病根除主要采用多种综合检测手段相结合、多个世代持续净化、每个世代开展多次全群净化的方案，对检出的阳性鸡进行严格淘汰。这一根除计划主要受到净化方法、人员支持、资金保障等因素的限制。尤其是检测技术方面，病毒分离法是检测该病的金标准，但技术要求高、耗时长，需结合Elisa法、PCR法、免疫胶体金检测技术等多种检测手段进行。由于专业技术人员的缺乏，加之净化及净化效果的维持需要长效持续的资金保障，只依靠企业自主能力难以实现。

4.3 开展药物与疫苗研发 疫苗和药物是防制禽白血病的重要手段。Sun Y等[12]发现栉孔扇贝多糖可通过阻断病毒吸附到宿主细胞而起到抑制作用，其中分子量越低，抑制作用越明显，提示该来源的多糖可用于禽白血病的预防和治疗。Yu C等[13]发现泰山马尾松花粉多糖（TPPPS）通过直接切断病毒感染和提高机体免疫力来抑制ALV-J病毒感染；TPPPS作为免疫增强剂，与gp85蛋白疫苗和不同佐剂联合使用时诱导的抗体应答和保护作用也进行了研究[14]，为ALV-J亚单位疫苗的研制提供了有力的依据。Wang X等[15]研制出一种ALV-J多变种抗原全价疫苗，该疫苗免疫后42 d，抗体滴度可达1∶64 000，且在SPF鸡中维持126 d以上免疫保护期。

5 结语

禽白血病感染普遍的高压下，由于缺乏有效的疫苗和药物，该病的防控形势极为严峻。尽管近几年我国对该病的重视程度越来越高，对禽白血病的研究也颇为广泛，但仍有许多问题亟待解决，且研究成果在生产中的应用广度和深度还不够。要加快推进禽白血病净化进程，从根本上解决禽白血病带来的影响及危害，需要了解禽白血病病毒感染和分子遗传机制。同时，作为免疫抑制性疾病，禽白血病疫苗研发尚处于起步阶段，要实现实验室到临床应用仍需要开展深入研究。现代生物学技术的飞速发展及其在动物医学方面的应用，有效促进了禽白血病在病原学、基因组特征、流行病学、检测方法和防治措施等方面的研究，使得通过药物和疫苗对该病进行控制成为可能，这将为从根本上实现禽白血病的有效防控提供保障。

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