刘芳

doi：10.3969/j.issn.1007-614x.2017.20.5

摘要 目的：建立茵桅黄口服液中木犀草素等HPLC含量测定的一种方法。方法：用Agilent ZORBAX SB-phenyl色谱柱；乙氰0.5%冰乙酸溶液体系作为流动相，梯度洗脫；流速：1.0 mL/min；检测波长：350 nm；柱温：30.9℃。结果：木犀草素进样量在0.16～1.68μg范围内线性关系良好（r=0.999 7）；平均回收率97.8%，RSD 0.7%（n=5）。结论：本法操作简便、结果准确、灵敏度高、重复性好，可用于茵桅黄口服液中木犀草素的含量测定。

关键词 茵桅黄口服液；木犀草素；高效液相色谱法

茵栀黄口服液为祛湿剂，具有利湿退黄、清热解毒功效。主治肝胆湿热所致的黄疸，症见小便黄赤，恶心呕吐，胸胁胀痛，面目悉黄，急、慢性肝炎等。为有效控制茵栀黄口服液制剂质量，我们参考相关文献用HPLC法对该制剂的木犀草素含量进行了测定，建立了HPLC测定茵桅黄口服液中木犀草素含量的一种方法。

方法与结果

色谱条件：①仪器和试剂：高效液相色谱仪采用日本岛津LC-2010CHT；检测仪UV-NIS；岛津LC-Solution工作站；Precisa 92SM-202A电子分析天平，感量0.01 mg；超声波清洗器。木犀草素（中国药品生物制品检定所）；色谱纯乙睛，其他试剂都是分析纯。茵桅黄口服液。②色谱柱：Agilent ZORBAXSB-phenyl（250am×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈0.5%冰醋酸流动相体系，行梯度洗脱；检测波长：350 nm；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL；按木犀草素峰计算理论塔板数应不低于3000。

对照品溶液的制备：取适量木犀草素对照品，加入70%乙醇配制成85μg/mL的溶液。

供试品溶液的制备：将茵栀黄口服液10mL转移至10mL量瓶中，加入50%的甲醇稀释，定容至刻度，摇匀，滤过。取续滤液用0.45μm的微孔膜过滤，所得滤液即为供试品溶液。

线性关系考察：分别精密吸取1、3、5、7、10 mL木犀草素对照品溶液f85μg/mL）置于10mL量瓶中，加70%乙醇稀释至10 mL。按上述测定色谱条件，分别吸取20 mL各浓度对照品溶液，注入HPLC色谱仪，记录峰面积，以对照品峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线。结果显示，进样量在0.16～1.68μg木犀草素范围内线性关系较好（Y=1.683×105X+232，r=0.999 7）。

精密度试验：取对照品溶液，连续进样5次，在色谱条件下测定，计算木犀草素峰面积，结果RSD为0.7%，精密度较好。

重复性试验：取样品茵桅黄口服液，按供试品溶液制备方法分别制备5份供试品溶液进行测定，测得木犀草素含量平均值48.3μ/g，RSD=1.2%。

稳定性试验：取供试品溶液，在0、4、8、12、24 h内进样5次，计算RSD=0.7%（n=5），表明供试品溶液在24 h内稳定。

样品含量测定：取样品5批，制得供试品溶液，吸取各20μL对照品溶液与供试品溶液，注入HPLC色谱仪，计算木犀草素含量，结果为34.1、48.4、41.5、32.3、47.1μg，g。

讨论

木犀草素是一种天然黄酮类化合物，为茵栀黄口服液中的重要成分，具有抗癌、抗过敏、抗菌、抗感染、免疫增强、祛痰和解痉等多种药理活性，主要用于治疗肝炎、心血管疾病、SARS、肌萎缩性脊髓侧索硬化症等。现代药理研究表明，木犀草素的抗炎活性与抑制一氧化氮（NO）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）等其他炎性细胞因子的产生，抑制核转录因子KB（NF-KB）介导的基因表达以及蛋白质络氨酸的磷酸化。

木犀草素是茵栀黄口服液中的主要有效成分之一，是茵栀黄口服液的主要质量控制指标成分。关于木犀草素的含量测定，一般有双波长分光光度法、HPLC和薄层扫描法等。茵栀黄口服液为复方制剂，测定时干扰成分较多。为减少其他成分的干扰，简化操作，我们选用HPLC色谱法对其进行定量，从而使测定结果的精密度提高。endprint