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油菜茎基溃疡病菌LAMP-HNB检测方法的建立

2018-01-25马新华袁俊杰卢乃会杨卓瑜王卫芳

广东农业科学 2017年10期
关键词:检测方法

龙 阳,马新华,袁俊杰,卢乃会,杨卓瑜,魏 霜,王卫芳

(1.湛江出入境检验检疫局,广东 湛江 524042;2.广东出入境检验检疫局,广东 广州 510623)

油菜茎基溃疡病菌是油菜上最严重的真菌病害之一,是我国重要的检疫性有害生物[1]。近年来,湛江口岸多次从进境油菜籽样品中截获该病菌。油菜茎基溃疡病菌正严重威胁着我国油菜产业的生产安全,高效快速检测技术成为预防油菜茎基溃疡病传入我国的关键措施之一。目前油菜茎基溃疡病菌常用检测方法主要有分离培养法、聚合酶链式反应(PCR)检测法以及发病症状观察法[2-4]。其中,分离培养法培养时间长,工作量大,如果完全通过分离培养来完成对病害的检疫鉴定,针对性差,费时费力,与快速通关的需求不符;PCR检测法具有快速、准确、重复性好的优点,但是其对检测设备和检测人员要求较高,难以适用于多种检测环境;发病症状观察法由于某些病原引起的症状相似,较难准确判定。本研究采用的环介导等温扩增技术区别于传统的PCR法[5],其不需要昂贵的PCR仪器,且特异性强、灵敏高、操作简单、扩增反应时间较短,比较容易在基层实验室推广使用等优点,目前已广泛应用于各类植物病原菌的检测工作中。张裕君等[6]应用该技术成功检测了苜蓿疫霉根腐病菌,Tomlinson等[7]等建立了灰霉病菌的LAMP检测方法,Niessen等[8]运用LAMP技术检测出了禾谷镰刀菌,田擎等[9]检测了黑白轮枝菌,戎振洋等[10]以TAT基因为靶标设计了一套用于检测水稻中Fusarium andiyazi的LAMP检测方法。……

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