李 琴 王天云 王小引 郭 潇 林 艳

(新乡医学院基础医学院分析测试实验室，新乡 453003)

哺乳动物细胞由于具备类似于人类细胞的翻译后加工修饰 (Post-translational modifications，PTMs)，因此，哺乳动物细胞表达系统是目前药物重组药物蛋白生产的重要平台[1,2]。哺乳动物细胞表达系统包括非人源化细胞和人源化细胞系，常用的非人源化哺乳动物细胞主要是中国仓鼠卵巢 (Chinese hamster ovary,CHO)细胞，目前近70%重组药物蛋白都是用CHO细胞表达系统生产的[2,3]。尽管非人源化哺乳动物类细胞具备安全性和有效性，但是由于PTMs方式不同，尤其是糖基化修饰与人源细胞存在差别，表达蛋白容易使人体产生免疫性，导致外来的重组药物蛋白被循环系统清除等[4]。

近年来，人们对人源细胞系作为重组药物蛋白表达系统做了大量工作，目前已经有人类胚肾细胞293 (Human embryonic kidney 293，HEK293)、纤维肉瘤细胞系HT-1080[5-11](fibrosarcoma HT-1080) 细胞生产的药物蛋白获美国食品药品监督管理局 (Food and Drug Administration，FDA)或欧洲医药局 (European Medicines Agency，EMA) 批准生产批准。此外，由PER.C6、HKB-11、CAP及HuH-7人源细胞生产的药物蛋白正在进行审批中[12-15]。本文对人源化细胞系用于重组药物蛋白研究进展做一综述。

1 人源化的细胞系

1.1HEK293细胞系 HEK293细胞来源于人胚肾细胞，最早由Graham[16]于1977年利用转染腺病毒5型DNA获得，近年来被应用于重组药物蛋白和病毒载体的生产。HEK293能够在SFM悬浮生长、易转染，具备生产重组药物蛋白的优点[17,18]。对HEK293细胞进行驯化和改造，已经培育出能在SFM生长迅速、转染效率高、表达水平高的细胞系，如HEK293-H、293-F等[19]。此外HEK293-T(293-T)细胞系表达猴病毒40 (SV40) 大T抗原，能够作为基因治疗表达高滴度的病毒基因载体，常用于生产腺病毒[20]。……