张爱琼，梁海英，曾智勇（编译）

（贵州大学动物科学学院，贵州 贵阳 550025）

圆环病毒（PCV）是圆环病毒科圆环病毒属无包膜单股环状DNA病毒。从全球范围来看，目前在猪群中鉴定出的有3种不同类型：PCV1、PCV2和PCV3，PCV1被广泛认为是非致病性的，而PCV2与一系列猪圆环病毒疾病相关，导致广泛的临床症状，给全球猪生产造成严重经济损失。猪圆环病毒3型（PCV3）是一种新型圆环病毒，首次在美国发现，随后在中国、韩国、波兰和意大利等国家检出，其基因组大小为2 000 bp，主要编码Rep和Cap蛋白。基于PCV3在许多国家和地区的广泛流行，为了解瑞典是否有PCV3的存在以及其基因组特性，Ye等应用PCR技术对瑞典猪群进行检测分析。

其 根 据 PCV3-US/SD2016（KX966193） 毒 株 设计2对 引 物（Rep-F 5'-TTTACGATAAACAACTGGA CCC-3'，Rep-R 5'-CATCTTCTCCGCAACTTCAG-3'，Cap-F 5'-CGTAGAAGTCTGTCATTCCA-3'和Cap-R 5'-AAGACGACCCTTATGCGG-3'）， 分 别 靶向PCV3的Rep基因和Cap基因，对1993年至2007年收集的49个存档的淋巴结样本的DNA[样本之前已经针对PCV2、Torque teno sus病 毒（TTSuV） 和 猪 博 卡 病毒（P BoV）进行了研究]进行检测，PCR反应体系如下 ：1×PCR 缓 冲 液，1.5 mM MgCl2，0.2 mM dNTP，0.2 mM每种引物和0.625 U AmpliTaq God DNA聚合酶。 反 应 程 序 为：95 ℃ 10 min；95 ℃ 15 s，55 ℃ 30 s，72 ℃ 35 s，35个 循 环 ；72 ℃ 5 min。 并 设 计 4条 引 物（Rep-F1 5'-CGAGAATTCCGAGATTGGCGAAGATTCC-3'Rep-R1 5'-CGAGAATTCTCTCGAGGTAATCCCCCT CT-3'，Cap-F1 5'-CGAGAATTCGCATAAGGGTCGTCT TGGAG-3'，Cap-R1 5'-CGAGAATTCTATGCGGAAAGT TCCACTCG-3'）扩增PCV3全基因组，将纯化的PCR产物插入pJET载体（Thermo Fisher）中送到Macrogen公司进行测序，并运用生物信息学软件DNAStar对PCV3测序序列进行编辑和拼接，运用MEGA 5.0软件进行遗传进化树的构建与分析。

研究结果显示，在49份样品中检测出有10份PCV3呈阳性，其中有1份不确定（只有Rep PCR呈阳性）；从2004年收集的样品获得一个PCV3基因组序列（PCV3/SWE84/2004）和一个微型PCV3样病毒（MPCLV/SWE84/2004）基因组序列，GenBank登录号分别为MG765473和MG765474。与先前报道的PCV3序列一样，PCV3/SWE84/2004的长度为2 000 bp，包括编码296个氨基酸 Rep蛋白和214个氨基酸 Cap蛋白的两个开放阅读框（ORF）。而MPCLV/SWE84/2004的长度只有839 bp，编码假定的……