□ 蒋晓凤 射洪县食品药品监督管理局

农产品是人类一切食物的来源，农产品质量安全更是与人们息息相关，食品农药残留俨然成为我国粮食安全和食品安全的重大安全隐患。在经济高速发展的今天，对食品中的农药残留的检测更需要快速、简便、灵敏度高的检测技术，才能保证食品和食用农产品的安全供应，酶联免疫吸附测定技术正适应了时代的需求。

酶联免疫吸附测定技术（ELISA）是以免疫荧光与放射免疫分析技术为基础所形成的，结合了抗原抗体反应的高度特异性以及酶的高效催化作用[1]。该技术具有反应快、特异性强、容易操作等特点，在临床标本、转基因食品、病原微生物以及药物残留等多个检测领域中有着相当广泛的应用，这些优点使其可在食用农产品从田间一直到餐桌各环节进行速测，将农产品的农残超标问题杜绝在源头。

1 酶联免疫吸附测定技术及其核心原理

酶联免疫吸附测定技术又名酶联免疫吸附测定试验（简称ELISA）。较早关于ELISA研究的是在1966年开始的，是一种固相酶免疫分析方法，是指通过抗体分子能与抗原分子特异性结合的这一特点，把各种游离的杂蛋白以及结合与固相载体的目的蛋白进行分离，同时通过特殊的标记物来对其进行定性或定量分析的一种检测方法[2]。该检测方法使用酶标记抗原或抗体以后，对抗原抗体特异性和酶本身的活性均不影响，因此ELISA具有准确性高、检测时间短、结果便于记录和保存等优点。

ELISA的原理主要包括以下几个方面。①抗原或抗体必须要能够吸附并且固定到载体的表面，并且还需要确保其保持免疫学活性。②抗原或者是抗体拥有能够连接形成仍然拥有良好免疫学活性以及酶学活性的共价键。③在酶结合物和相应的抗原或者是抗体相结合之后，根据所加入底物的颜色反应，来对其是否存在免疫反应进行有效判断，颜色的深浅则是和标本中相应抗原或抗体的量成正比，是计算样品中抗体或抗原的浓度的重要依据[3]。④酶起主导作用，其中辣根过氧化物酶又是关键中的关键，它能形成的对抗体抗原特异具有免疫反应和催化酶促反应的酶结合物。

2 酶联免疫吸附测定技术在食品农药残留快速检测中的应用

农药残留是在农业生产过程中直接或间接残存于食品和食用农产品中的微量农药、有毒代谢物、降解物等物质的总称。而ELISA在农药残留物的实际检测中，较为普遍的方法是生化检测法，检测时主要是将乙酰胆碱酯酶和待检测样品的提取液进行一定比例的混合，进行充分配比后，固定相应的反应时间，以二硫双硝基甲苯酸作为显色剂，发生反应后进行比色。提取液中不含残留物时，说明酶的活性不会被抑制，而存在残留物时，说明酶的活性被抑制。根据残留物的多少，可以有效判断酶活性被抑制的程度，残留物越多，说明被抑制性越强。ELISA主要是通过有机磷和氨基甲酸酯类农药对其本身的乙酰胆碱酶的差别特异性抑制反应来检测农药残留量，相对结果较为准确，误差小，所以利用有效的实验检测相应的生化反应，可以有效检测农药的综合残留量。此方法使用起来快捷、灵敏，而且成本较低，适于标准化管理且容易制备试剂盒，非常适合大规模的现场样品筛选[4]。

3 展望

ELISA具有高灵敏度、强特异性、低成本、快速简便、高自动化以及低污染等优点，但同时也存在不能同时分析多种成分、对试剂的选择性高、对结构类似的化合物有一定程度的交叉反应等问题[5]。所以将来对ELISA在食品农药残留快速检测中的研究主要集中在高度免疫原性的重组抗原技术难题上。此外还应将ELISA与色谱、PCR等先进主流技术实现优势互补，才能让ELISA在未来食品中农药残留快速检测乃至于整个食品安全快速检测过程中发挥更加卓越的贡献。