外泌体是由多种活体细胞分泌的囊泡小体，其中含有蛋白质和RNA等多种成分，直径大多介于40～150 nm之间。外泌体作为蛋白质、核酸以及脂类物质的运输及存储工具，存在于血液、尿液、唾液及腹水等体液中，囊内成分由于囊泡的保护而不被降解，可作用于较远的细胞或组织，广泛参与多种疾病的病理生理学过程。近年研究表明，急性胰腺炎(AP)患者外周血中外泌体含量显著升高，且胰腺癌(PC)患者循环系统中肿瘤细胞来源的外泌体水平亦明显升高，并在上述胰腺疾病的病程演进中发挥重要的生物学调控作用，已成为胰腺领域中的研究热点[1-2]。而慢性胰腺炎(CP)的反复发作和转归也与外泌体生物学效应的发挥密切相关。本文对外泌体在胰腺疾病发生发展中作用的最新研究作一综述。

一、外泌体概述

外泌体内含有大量特异性的蛋白质和核酸(DNA、mRNA和miRNA等),还有脂类(胆固醇和神经酰胺等)、膜转运蛋白(膜连蛋白、Rab27和SNAP25等)、分子伴侣 (Hsp70和Hsp90等)、抗原递呈相关的大量组织特异性蛋白、整合素类、四次跨膜蛋白(CD9、CD63、CD81和CD82等)和主要组织相容性复合体(MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ)等[3-13]。外泌体表面的特异性标志物主要有CD63、CD81、CD9、TSG101和HSP27等。

目前，外泌体的提取方法主要有差速离心法、超速离心法、过滤离心法、密度梯度离心法、免疫磁珠法和色谱法，而鉴定方法则主要包括透射电子显微镜、纳米颗粒跟踪分析技术、蛋白质印迹法和流式细胞术。外泌体的常规储存条件为-80℃，重复的冷冻和融化会影响囊泡的完整性[14]。外泌体分离鉴定后，可结合芯片和二代测序结果筛选与疾病相关的差异表达因子，并最终分析其可能参与的生物学功能及信号通路。……