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濒危植物蒙古扁桃ISSR反应体系优化

2018-01-12丁海麦石松利

江苏农业科学 2017年24期
关键词:体系优化

丁海麦, 白 羽, 石松利

(1.包头医学院基础医学与法医学院,内蒙古包头 014040; 2.包头医学院药学院,内蒙古包头 014040)

蒙古扁桃(Amygdalusmongolica)为蔷薇科(Rosaceae)桃属(Amygdalus)植物,是亚洲中部戈壁荒漠区特有的旱生落叶灌木、国家三级濒危保护植物[1]。蒙古扁桃是荒漠区重要牧草,其叶、嫩枝、花及果实均为家畜喜食,在植被稀疏干旱少雨荒漠区,草原牧民称之为“救命草”[2]。同时,蒙古扁桃为传统的中药材,以种仁入药,性苦,味平,主治干咳、咽喉干燥、支气管炎及阴虚便秘,还可制成止痛剂和镇静剂,对糖尿病、高血压、神经衰弱、肺炎等有一定疗效[3-4]。由此可见,蒙古扁桃具有广阔的开发价值。蒙古扁桃的研究目前主要集中在有效成分提取分离、鉴定分析技术、药理性等方面,且均取得一定成果,但对于蒙古扁桃资源的各地品种遗传多样性水平和遗传结构研究仍不多。

简单重复序列区间(inter simplese quencerepeat,简称ISSR)是在微卫星技术上发展起来的分子标记技术,是一种简单高效的遗传标记方法,具有多态性高、产物特异性强等特点[5],该技术已广泛应用于作物、花卉、中药材遗传多样性和亲缘关系研究中。ISSR原理是利用锚定的SSR-DNA作为引物进行PCR扩增,进而检测相邻SSR之间基因组DNA序列的差异。由于ISSR分子标记技术是基于PCR技术开发的,影响扩增结果的因素包括引物、模板DNA浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq酶活性等,对于不同的反应体系和扩增程序,ISSR的结果是不同的[6]。因此,为确保ISSR-PCR扩增结果的稳定和准确,需对此扩增反应体系进行优化。本研究……

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