张 琳，余 斌，倪 征，陈 柳，云 涛，叶伟成，华炯钢，崔言顺，张 存

(1.浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所，浙江 杭州 210021； 2.山东农业大学 动物科技学院，山东 泰安 271018)

鸭坦布苏病毒E蛋白线性化B细胞抗原表位的鉴定

张 琳1，2，余 斌1，*，倪 征1，陈 柳1，云 涛1，叶伟成1，华炯钢1，崔言顺2，张 存1

(1.浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所，浙江 杭州 210021； 2.山东农业大学 动物科技学院，山东 泰安 271018)

为鉴定鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus，DTMUV)的B细胞抗原表位，以纯化的DTMUV YY5株为抗原制备了2株单克隆抗体AE4和BD10，研究证实BD10为线性化表位，其结合的抗原表位位于E蛋白的第三结构域(Domain Ⅲ，DⅢ)。将DTMUV E蛋白DⅢ结构域基因截短为具有末端相互重叠的15段，与MBP融合表达后以单克隆抗体BD10进行肽库扫描，结果筛选出DTMUV一个B细胞线性表位385LVGSGKGQI393(EP385)。该表位原核融合表达产物免疫小鼠制备的抗体，能够和DTMUV E蛋白反应，表明EP385表位具有良好的免疫原性，可为DTMUV多肽疫苗的研制及特异血清学诊断方法的开发奠定基础。

鸭坦布苏病毒；单克隆抗体；肽库扫描；抗原表位

2010年4月以来，浙江、江苏、安徽、福建、上海、山东、河北等水禽主产区先后暴发一种以蛋鸭、种鸭产蛋量骤然大幅下降为主要临床特征、以出血性卵巢炎为主要病变特征的急性传染病，经济损失高达数十亿元[1]。随着病原学研究的深入，该病病原被确定为一种黄病毒，即鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus，DTMUV)[2]。近年来，鸭坦布苏病毒病的流行呈现地方流行性，是危害我国水禽养殖业的主要疫病。

DTMUV基因组由5’端和3’端非编码区和一个开放阅读框组成，编码3个结构蛋白和7个非结构蛋白，其中DTMUV E蛋白由501个氨基酸残基构成，含有1个糖基化位点[3-4]。……