李晓琼

【摘要】：苹果病毒主要通过嫁接途径传染，随接穗等无性繁殖材料扩散。因此，培育无病毒母本树，栽培无病毒苗木，是防治苹果病毒病的根本对策。而且无病毒苗木抗逆性强，能适应山地、滩地栽培，且具有良好的园艺性状和生产性能，可减少化肥施用量，降低生产成本，减少环境污染，有利于生产无公害优质果品。

【关键词】：苹果树；无病毒树苗；培育技术

果树病毒病及其类病毒病害均经嫁接传染，随繁殖材料远距离传播。而一旦感染病毒，终身则不得免除，加之目前没有能够有效防止病毒病的化学药剂和生物制品。因此，果树无病毒种苗的生产在病毒病防治上具有重要地位。

1、原种培育和保存

1.1待脱毒材料

凡准备进行脱毒处理的品种和砧木均应是通过国家或省农作物品种审定委员会审定的品种和砧木。选取经3年以上观察未发现过锈果病、绿皱果病和花叶病症状的结果树作为待脱毒材料母本树，从其上采集接穗作为待脱毒材料。

1.2脱毒处理

1.2.1热处理脱毒法

于每年4月中旬，从待脱毒品种植株上剪取接穗，采用切接法嫁接在盆栽实生砧苗上，每品种10-15盆。嫁接成活后，按常规苗在室外进行管理。翌年2月上中旬将待脱毒盆栽苗移入温室，从地面以上20cm剪截留3-5个饱满芽。同时将盆栽砧木移入温室，使其萌动生长。待脱毒苗萌动长出幼叶后，移入恒温热处理箱，将温度控制在28-30℃。3-5d后待盆栽苗长出3-5片新叶时，将温度调至（38±1）℃，进行热处理并开始计时。热处理28d后，从抽发的新梢顶端，切取1.0-1.5cm的嫩梢，采用劈接或皮下嫁接法嫁接在预先准备好的盆栽实生砧木上，用塑料薄膜包扎，并套上白色透明塑料袋保温，放阴凉处，2周后取下塑料袋，約10d后再移入温室内有阳光处，待长出3-5片新叶后移到室外锻炼10-15d，即可移入苗圃，按正常苗进行管理。

1.2.2茎尖培养脱毒法

（1）脱毒材料准备。从田间大树上切取2-3cm长的新梢顶尖，用70%酒精浸渍30s，用0.1%升汞灭菌5min，无菌水冲洗3-5遍，在解剖镜下剥离幼叶和叶原基，切取0.1-0.2mm的茎尖，接种到分化培养基上，在（25±2）℃、光照度1500-2000lx、光照10h/d的条件下培养。每个月换1次培养基，3-4个月后可分化出新芽。

（2）增殖培养。培养基、培养条件与初代培养相同，每隔30-40d转接1次。增殖试管苗可采用酶联免疫吸附法进行病毒初检，带毒样品剔除或进行热处理脱毒。

（3）诱导生根。从初检不带毒样品上切取长1.5cm的嫩梢插入生根培养基中，在25℃下经15-20d即可长出新根。对生根率较低的品种可适当调整生长调节剂的浓度或加入间苯三酚或增加培养代数。

（4）移栽。栽前将组培生根苗置于强光下，闭瓶锻炼2d（加少量水）。以腐殖土、砂或蛭石为基质，洗净根部粘附的培养基后栽到基质中，浇透水，盖上塑料薄膜和报纸保温遮阴，10d后逐渐通风透光，每周浇1次1/4-1/8MS营养液促进生长。初春为移栽适期，温度保持在15-25℃。（5）移入苗圃。将移栽成活的组培苗移到室外炼苗1-2周。圃地开沟打垅，施入基肥，将苗带土移栽，灌足水。

（6）病毒检测。8月份从移栽成活苗上剪取带12-15个饱满芽的枝条，按芽系编号，采用指示植物进行鉴定。检测后保存无病毒的芽系，将带病毒的芽系剔除或再次热处理。

1.3脱毒材料的病毒检测

经脱毒处理获得的材料先通过血清学方法进行检测，显阳性反应的剔除，显阴性反应的再采用木本指示植物法进行检测。

1.4无病毒原种的保存

1.4.1保存方式

苹果品种和砧木，经过脱毒处理和病毒检测后，确认无病毒后即可作为无病毒原种，保存在培育原种的单位，保存的方式有田间原种保存圃保存和室内组培保存，有条件的建立基因库保存。

（1）田间原种保存圃保存。无病毒原种树最好盆栽于有防虫保护网设备的网室内或专门的温室里，并远离有病毒潜伏来源的果园2km以上。（2）组培保存。由组织培养方法获得的无病毒原种可以保留在瓶内继代培养。如果需用接穗，可以扩繁几代，移至田间。

1.4.2病毒检测

无病毒原种树每5年应进行1次病毒检测，发现问题即剔除。检测机构要将病毒检测结果报告主管部门。

2、苗木繁育

2.1苗圃的建立

选择的苗圃地应地势平坦，有灌溉条件，土壤肥沃，有机质含量丰富，酸碱度适中，距一般苹果、梨园或一般生产性苗圃50m以上，5年没有种植过苹果树、梨树或繁育过苹果苗、梨苗，交通方便的地方。

2.2苗圃规划和建设

苗圃规划应从便于管理的角度出发，划分为若干小区。规划出实生苗播种区、无性系砧木繁殖区、成苗培养区以及休闲区等。并按规划设计出各级道路、排灌系统，并统筹安排，平整土地，改良土壤，以及增施有机肥。

2.3实生砧木培育

砧木种子必须采自无病毒砧木采种园或经病毒检测确认无病毒的种子。秋季或早春播种。播前每667m2施有机肥2500-3000kg、磷肥100kg，深翻土地，平整作畦，施用杀菌剂和杀虫剂，进行土壤消毒。播种方法和田间管理与一般生产性苗圃相同。

2.4无性系砧木培育

无性系砧木繁殖材料，必须来自无病毒母本园。繁殖方法：（1）直接从无病毒母本园引进无性系砧木自根苗，经过一年集中培育，秋季嫁接栽培品种；（2）从无病毒母本园采集无性系砧木种条，嫁接在无病毒的实生砧木上，准备培养中间砧木，然后再嫁接无毒品种接穗；（3）用组织培养方法快速繁殖无病毒无性系砧木。

2.5嫁接苗的管理

2.5.1接穗的采集

接穗必须从无病毒苹果品种采穗圃采集，剪下的接穗立即剪去叶片，按株分扎成捆，并登记母本树的品种（品系）名称及采集时间。

2.5.2嫁接

秋季采用芽接法，春季采用枝接法，接后要按品种、品系分别记载。补接时，必须保证与原来嫁接的母株相同，否则不予补接。

结语：

从原种培育和保存、母本园的建立、病毒检测、检察记载及苗木繁育管理技术等方面，详细介绍了无病毒苗木繁育体系的各个组成部分及详细操作规程，以期规范我国无病毒苗木繁育行为，推进我国苗木繁育产业健康发展。

【参考文献】：

[1]李亚芸，苏瑞芳，陈小飞。苹果无病毒苗木繁育技术规程[J].山西果树，2012（3）：42-44.

[2]李德智。苹果无病毒苗木繁育技术及品种[J].北京农业，2006（6）：24.

[3]孙运村，徐德坤，崔梅，等。苹果无毒苗嫁接繁育技术[J].山东农业科学，2016（5）：27.