封雍婕 郑鑫 杨福民 杜丽琨 邱雪琳 秦玥 夏烈文

摘 要：利用预先堆肥的方式富集耐受双甘膦微生物，进而筛选出能降解双甘膦的细菌并研究其降解效果，为处理含双甘膦废弃物提供依据。结果表明，筛选得到的微生物具有降解双甘膦能力，降解产物主要为无机磷酸盐。

关键词：双甘膦； 降膦菌；磷酸盐

1引言：

双甘膦是广泛使用的草甘膦除草剂IDA法生产过程中的中间体。双甘膦生产过程中产生的含双甘膦废弃物是草甘膦行业环保问题的重要关注内容，目前主要采用物化方法进行处理。物化方法往往工艺条件苛刻、成要高昂、容易产生二次污染。微生物方法是废水处理的常用手段，具有条件温和、成要低廉的优势。研究微生物降解双甘膦性能，对探索生化法处理双甘膦废水可能性具有重要意义。

2实验部分：

2.1材料

双甘膦（含量≥98%）取自草甘膦企业生产车间，菌种来源为城市下水道泥与景观阔叶林落叶、果皮、双甘膦混合物长期培养所得土样。

培养基的配制。

基础盐培养基：称取2.00g （NH4）2SO4、0.20g MgSO4·7H2O、0.60g NaH2PO4·2H2O、0.65g K2HPO4·3H2O、0.64g CaCl2、3.00g双甘膦加水搅拌溶解，调节pH 7。121℃灭菌20分钟后备用。得到含磷源基础盐培养基，同样方法，但以NaCl和KCl代替NaH2PO4·2H2O和g K2HPO4·3H2O，得到不含磷源基础盐培养基。

平板固体培养基：

基础盐平板固体培养基：按含磷基础盐培养基比例加入无机盐和水，溶解扣按2%wt加入琼脂粉，加热搅拌使其溶解，定容至1000mL。

牛肉膏蛋白胨培养基：称取3g牛肉膏、10g蛋白胨、15gNaCl、20g琼脂粉加水搅拌溶解，调节pH 7，定容至1000mL。

培养基在高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌20分钟，冷却至50℃左右，無菌条件下倒入培养皿中，完全凝固并冷却后分别得到基础盐平板固体培养基和牛肉蛋白胨平板固体培养基。……