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基于原子力显微镜的不同固化液对肾细胞固化状态的影响

2017-12-29张文晓

山东工业技术 2017年24期

摘 要:细胞固化技术是利用介质将活细胞固定在反映溶液中,且尽可能完整的保存细胞的原有结构。针对细胞固定过程中遇到的细胞破裂、细胞过渡收缩、细胞核固定性差等问题,本文采用原子力显微镜对甲醇、戊二醛、丙酮固定的肾细胞进行形貌测量。经对比分析发现戊二醛对肾细胞的固化能够更完整的保存细胞的原有结构。

关键词:细胞固化;原子力显微镜;细胞测量

DOI:10.16640/j.cnki.37-1222/t.2017.24.251

1 引言

原子力显微镜是通过检测待测样品表面和一个微型力敏感元件之间的极微弱的原子间相互作用力来研究物质的表面结构及性质。它可以实现对样品的“推”、“拉”、“刻划”、“切割”、“搬运”等操作功能[1]。还可以实现样品的表面成像、粗糙度测量、高度测量等检测功能。传统观测细胞的仪器为光学显微镜,其分辨率在微米级别,且不能准确的得出所观测细胞的尺寸、粗糙度、高度等信息。而原子力显微镜具有纳米级分辨率,可在空气或者各种近生理条件下工作,直接探测生物细胞的高度、直径、体积、弹性等信息,能够在微/纳尺度上更加详细地了解和掌握生物细胞的表面形貌、结构特征、功能及特性等。这种优势使其正逐渐发展为细胞生物学研究中的有效工具。但是,因细胞具有一定的柔性,直接在生理溶液中对细胞进行原子力显微镜成像,会有成像分辨率不高、细胞膜表面蛋白成像不稳定等缺点。因此为获得较高的细胞表面成像的分辨率,我们常会利用固化剂对细胞进行固化处理,虽然经固化剂处理后,细胞失去了活性,但对于细胞骨架、细胞膜表面褶皱、细胞器、微绒毛等研究却有不可或缺的作用。……

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