吕建敏，蔡兆伟，蔡月琴，潘永明，刘军平，徐剑钦，黄俊杰

(浙江中医药大学动物实验研究中心，杭州 310053)

研究报告

基于OPG-RANK-RANKL系统研究饲粮不同钙水平对生长期WHBE兔骨代谢的影响

吕建敏*，蔡兆伟，蔡月琴，潘永明，刘军平，徐剑钦，黄俊杰

(浙江中医药大学动物实验研究中心，杭州 310053)

目的利用护骨素-核因子κB受体活化子-核因子κB受体活化子配体(OPG-RANK-RANKL)系统，探讨饲粮不同钙水平对生长期WHBE兔骨代谢影响。方法选择21只雄性断奶WHBE兔，随机分为3组(I、II、III组)，分别饲以钙水平为0.95%，1.10%和1.30%，其他营养水平基本一致的饲粮。实验期42 d。实验结束，测定兔血清钙(Ca)、甲状旁腺素(PTH)和骨源性碱性酶 (BALP)含量；分别运用荧光定量PCR法和免疫组织化学法对WHBE兔骨组织进行OPG-RANK-RANKL的基因转录和蛋白表达分析。最后以RANKL/OPG比值为指标，评估WHBE兔骨代谢与饲粮钙水平间的相关性。结果实验结果表明，I、II、III组在血清Ca、PTH含量和BALP活力上差异无显著性(P>0.05)。WHBE兔骨组织RANKL mRNA表达水平和RANKL/OPG mRNA比值均以II组最低，与I、III组差异有显著性(P<0.05)。钙水平对WHBE兔骨组织OPG-RANK-RANKL蛋白表达影响显著(P<0.01)，II组和III组OPG蛋白表达阳性指数均极显著高于I组(P<0.01)；而II组兔骨组织RANK蛋白表达阳性指数则极显著低于I组和III组(P<0.01)，RANKL/OPG的蛋白表达阳性指数比值以II组最低，与I组差异有显著性(P<0.01)。此外，WHBE兔骨组织RANKL/OPG mRNA比值和的蛋白表达阳性指数比值均与饲粮钙水平间存在显著的二次曲线相关(R2=0.4068,0.8433，P<0.05，P<0.001)。结论生长期WHBE兔的骨代谢与饲粮钙水平间呈显著相关性，当饲粮钙含量为1.10%时，生长期WHBE兔可获得较理想的骨代谢水平。

OPG-RANK-RANKL系统；钙；WHBE兔；骨代谢

钙是组成骨骼的重要成分，合理的饲粮钙水平对保证动物骨骼健康和维持正常骨量必不可少[1]。传统钙营养需要研究所采用的观察指标主要是动物的生长性能，营养物质消化率和钙代谢平衡等宏观指标[2]，不能精确反映钙的摄入对骨代谢水平的影响。护骨素(osteoprotegerin,OPG)-核因子κB受体活化子(receptor activator of NF-κB,RANK)-核因子κB受体活化子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)是近年发现的调节骨代谢的重要系统[3，4]，以RANKL与OPG比值来反映骨破坏程度[5]。虽然该系统目前在营养学研究中应用较少，但已广泛用于骨代谢疾病发病机制和药物疗效的研究[6-9]。另……