蔡 鑫，邓 灯，王 颖，王文琪

( 1.青岛农业大学 海洋科学与工程学院，山东 青岛 266109；2.青岛农业大学 合作社学院，山东 青岛 266109 )

三疣梭子蟹多克隆抗体与4种经济蟹类血细胞交叉反应的研究

蔡 鑫1，邓 灯2，王 颖1，王文琪1

( 1.青岛农业大学 海洋科学与工程学院，山东 青岛 266109；2.青岛农业大学 合作社学院，山东 青岛 266109 )

采用激光共聚焦扫描显微镜技术、免疫印迹技术和流式细胞术3种方法对鼠抗三疣梭子蟹血细胞多克隆抗体与黄道蟹、日本蟳、中华绒螯蟹、勘察加帝王蟹血细胞的免疫交叉反应进行分析。激光共聚焦扫描显微镜结果表明，该抗体与黄道蟹、日本蟳、勘察加帝王蟹、中华绒螯蟹血细胞均发生了免疫交叉反应，且发生反应的抗原决定簇均位于细胞膜上；流式细胞术测定该抗体与黄道蟹颗粒血细胞和透明血细胞交叉反应阳性率最高，分别为99.45%、98%，与中华绒螯蟹颗粒血细胞和透明血细胞交叉反应阳性率最低，阳性率分别为81.34%、78.56%；免疫印迹结果显示该抗体与日本蟳血细胞结合的蛋白分子量是80、38.5 ku；与勘察加帝王蟹血细胞结合的蛋白分子量是80、93 ku；与中华绒螯蟹血细胞结合的蛋白分子量是82、41、30 ku；与黄道蟹血细胞结合的蛋白分子量是70、43 ku。

三疣梭子蟹;多克隆抗体;交叉反应

三疣梭子蟹(Portunustrituberculatus)、黄道蟹(Cancermagister)、日本蟳(Charybdisjaponica)、中华绒螯蟹(Eriocheirsinensis)、勘察加帝王蟹(Paralithodescamtschaticus)均属于甲壳类，因味道鲜美而深受大众喜爱[1-2]，具有较高的经济价值[3]，但近年来随着工厂集约化养殖规模扩大，各种疾病大规模爆发[4]。由于甲壳类动物缺乏适应性免疫，主要依靠非特异性免疫抵抗病原体，而参与非特异性免疫的细胞主要为血细胞，可通过吞噬、包埋、伤口修复、聚集、增生等方式消灭入侵的病原体[5-7]。……