王禹，于非，谭巍，刘万达

(黑龙江省农科院园艺分院，哈尔滨 150069)

金线莲快繁体系的建立

王禹，于非，谭巍，刘万达

(黑龙江省农科院园艺分院，哈尔滨 150069)

试验采用福建戴云山金线莲的组培苗为材料，研究适宜生长培养的外植体及培养基；丛生芽增殖最佳培养基；组培苗生根的最佳培养基，以期建立金线莲组织培养快繁体系，提高繁殖速度和质量。结果表明：福建戴云山金线莲生长培养的最佳外植体为根状茎，培养基为MS + 1mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA；丛生芽增殖的最佳培养基为MS + 2mg/L 6-BA + 0.1mg/L NAA；组培苗生根的最佳培养基为MS + 0.3mg/L IBA + 0.5mg/L NAA。

金线莲；组织培养；快速繁育； 根状茎

金线莲[Anoectochilusroxburghii(Wall.) Lindl]，又名金线兰、鸟人参等,属兰科植物，其生态分布也较特殊，适应性较窄，主要生长在深山密林下或溪涧旁潮湿的草丛中或竹林下，特别是阔叶林下的阴湿地带[1]。金线莲是我国传统的中药材，它清凉解毒、滋阴降火、消炎止痛，对无名肿痛、发烧、止泻、蛇伤等均有显著的疗效[4]，因此，金钱莲具有广阔的开发利用前景。

由于金线莲对生态条件要求较严，而适应性较差，传统的扦插、种子等繁殖方式繁殖率极低，因此建立金线莲经济、高效的种苗繁殖技术，具有重要的意义[3]。本试验以金线莲组培苗为材料，筛选出适宜组织培养的外植体，外植体生长、丛生芽增殖和生根的培养基，建立起金线莲组织培养的技术体系，提高的金线莲的繁殖速度和数量。

1 试验材料

本试验采用福建戴云山金线莲的组培苗为材料，采用的培养基均为MS + 生长激素 + 30g/L蔗糖 + 7g/L琼脂，pH=5.7；培养温度为25℃；光照时间14h/d。

2 实验内容与方法

2.1 适宜生长培养的外植体

将金线莲组培苗的茎和根状茎分别切成2cm大小，接种到生长培养基上，生长激素，采用6-BA、NAA；每瓶接种5个外植体，接种6瓶，30天后调查萌芽情况。萌芽率(%)=萌芽的外植体数/接种的总外植体数×100%。

2.2 不同生长激素对丛生芽增殖的影响

将组培苗的根状茎切成2cm大小，接种到增殖培养基上，生长激素采用6-BA、NAA、TDZ；每瓶接种5个已萌芽的外植体，接种6瓶，30d后调查增殖情况。增殖系数=增殖后芽个数/接种的总芽个数。

2.3 不同生长激素对组培苗生根的影响

选取长成3cm高的组培苗，切成带3～4个芽的丛状，转接到生根培养基上，生长激素采用6-BA、NAA、 IBA，每瓶接种5个丛生芽，接种6瓶，30d后调查组培苗生根情况。生根比率(%)=生根的丛生芽个数/接种的总丛生芽个数×100%；生根条数=每个丛生芽生出的根条数。

3 结果与分析

3.1 适宜生长培养的外植体选择

表1 不同外植体生长情况

从表1看出金线莲适宜的外植体为根状茎，易于丛生芽产生。随着6-BA浓度的升高丛生芽产生速度加快，并且适当添加NAA可促进丛生芽的产生，但6-BA浓度高于3mg/L时，会导致芽黄化，生长发育不良。因此，金线莲根状茎的最适宜生长培养基为MS + 1mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA。

3.2 适宜丛生芽增殖的生长激素筛选

表2 生长激素对丛生芽增殖的影响

从表2得出金线莲丛生芽增殖的最佳培养基为MS + 2mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA，增殖系数可达到4.3。且随着6-BA和TDZ浓度的升高金线莲丛生芽增殖加快；虽然添加NAA可促进丛生芽的产生，但浓度高会导致其增殖速度减慢，生长加快，因此要适当添加。

3.3 筛选适宜组培苗生根的生长激素

表3 生长激素对组培苗生根的影响

从表3得出，组培苗生根的最佳培养基为MS + 0.3mg/L IBA + 0.5mg/L NAA，随着IBA浓度升高，生根条数增多和生根率增高，并且适当的添加NAA有利于组培苗生长。

4 结论与讨论

福建戴云山金线莲生长培养的最佳外植体为根状茎，培养基为MS + 1mg/L 6-BA + 0.2mg/L NAA；丛生芽增殖的最佳培养基为MS + 2mg/L 6-BA + 0.1mg/L NAA；组培苗生根的最佳培养基为MS + 0.1mg/L IBA + 0.5mg/L NAA。

在实验过程中发现，金线莲在生长培养时，有时芽萌发较慢，可达到50天后萌芽，及时更换培养基即可。在增殖培养过程中，添加NAA可促进丛生芽的产生，但浓度高会导致增殖率下降，从而生长加快，因此要适当添加。在生根培养过程中，要综合考虑组培苗的生根率和是否健壮，选择激素配比。

[1]罗晓青,申刚,蒙秋伊,等.兴仁金线莲组织培养与快繁试验[J].西南农业学报,2014,27(1):331-334.

[2]张铁.金线莲组织培养研究进展[J].文山学院学报,2013,26(6):11-14.

[3]刘润东,郭文杰,林忠宁,等.金线莲组织培养及营养成分的分析研究[J].广西农业科学,2006,37(5):506-509.

[4]陈兆贵.金线莲组织培养和移栽技术研究[J].惠州学院学报,2007,27(6):14-17.

[5]李丽容,金开正.铁线莲组培快繁技术研究[J].安徽农业科学,2016(15):138-139.

[6]姜丽琼,李文俊,肖前刚,等.金线莲在成都地区的组培繁殖技术研究[J]. 林业科技通讯,2016(5):32-36.

[7]靳松,陈泽斌,夏体渊.金线莲试管苗高效快繁技术研究[J].时珍国医国药,2016(6):1491-1493.

[8]陆素君.金线莲茎段组织培养技术的研究[J].湖北林业科技,2016(3):23-26.

TheEstablishmentofRapidPropagationSystemofAnoectochilusroxburghii

Wang Yu,Yu Fei,Tan Wei,Liu Wanda

(Horticultural Sub-academy of Heilongjiang Academy of Agriculture Sciences,Harbin,150069)

In this experiment,the materials is somaclone ofAnoectochilusroxburghiiin Fujian Dai Yunshan,we study suitable for growth of explant and medium; Plant growth regulator effects on adventitious bud proliferation and rooting of tissue culture seedling,in order to establish aAnoectochilusroxburghiitissue culture rapid propagation system.It will be used to improve the speed and quality breeding. The results show that the best of explants is rhizomes; optimum adventitious bud regeneration medium for MS + 1mg/L 6-BA + 0.2 mg/L NAA; Best adventitious bud proliferation culture medium for MS + 2mg/L 6-BA + 0.1 mg/L NAA; The best rooting culture medium for MS + 0.1mg/L IBA + 0.5 mg/L NAA.

Anoectochilusroxburghii；Tissue culture；Rapid breeding；Rhizomes

2017-08-18

王禹(1982-)，女，硕士研究生,助理研究员，从事植物组织培养的研究，E-mail:liuwanda1982@126.com。

DOI.:10.13268/j.cnki.fbsic.2017.06.014

S567.23

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