刘 荣 娜， 江 国 金， 陈 瑞 华， 赵 长 新

( 1.大连工业大学 生物工程学院， 辽宁 大连 116034；2.中粮麦芽(大连)有限公司， 辽宁 大连 116200 )

带电蛋白质对α-淀粉酶活性及酶促反应的影响

刘 荣 娜1， 江 国 金2， 陈 瑞 华1， 赵 长 新1

( 1.大连工业大学 生物工程学院， 辽宁 大连 116034；2.中粮麦芽(大连)有限公司， 辽宁 大连 116200 )

利用Zeta电位仪对带电蛋白质表面的Zeta电位进行测量，在不同浓度梯度的还原型谷胱甘肽、牛血清蛋白和两种蛋白的混合溶液中分别加入α-淀粉酶，测定目标酶系的活性、米氏常数、活化能等参数。结果表明，分别加入浓度为0.6 mmol/L还原型谷胱甘肽、牛血清蛋白和两种蛋白的混合溶液的酶活力分别提高7.9%、8.7%、11.1%，米氏常数从129.7 g/L分别降低至116.0、104.2、85.1 g/L，最大反应速率从32 g/(L·min)分别降至30.50、28.10、23.79 g/(L·min)，活化能从13.91 kJ/mol分别降至10.00、9.91、9.88 kJ/mol。这种改变与蛋白质的浓度呈正相关，线性关系良好。说明不同带电蛋白质的加入使α-淀粉酶的活性增大，酶与底物的亲和力增加，反应速率加快，效率更高。

α-淀粉酶；带电蛋白；活化能；Zeta电位

0 引 言

α-淀粉酶(1,4-α-D葡聚糖葡聚糖水解酶；E.C.3.2.1.1) 可以水解淀粉内部的α-1,4-糖苷键，水解产物为糊精、低聚糖和单糖[1]。酶作为一种高效、专一的催化剂，在很多领域都得到了广泛的应用，比如医学、食品和饮料、洗涤、皮革等行业[2-3]。在磁场和电场方面的研究已经有诸多报道[4]，包括脉动场和静电场，这些研究大多以酶的活性、米氏参数和酶的二级结构为研究对象，结果显示场的存在使酶促反应过程中酶活、米氏参数和二级结构均发生了改变，但是对于反应所需活化能的研究未有涉及，并且对于这种变化都没有合理地解释[5]。……