徐 飞，黄巧婷，曹建民，王 平，徐玉明

低氧调控EIMD后肌细胞膜损伤MAPK机制的探索与验证

徐 飞1，黄巧婷2，曹建民2，王 平1，徐玉明1

目的：探索运动性肌损伤（EIMD）后低氧调控肌细胞膜损伤的MAPK机制，并进行验证。方法：健康雄性SD大鼠随机分为对照组、常氧24 h、48 h、72 h组和低氧24 h、48 h、72 h组。大鼠以EIMD运动模型进行间歇性下坡跑离心运动，腹腔注射伊文氏蓝荧光染色剂（EBD），取腓肠肌样本，用激光共聚焦显微镜观察EBD切片和阳性细胞率（PRC）评价膜损伤。用RT-qPCR和Western blot测定MAPK的ERK1/2、JUN、p38和BMK1的mRNA表达、蛋白含量和磷酸化水平。再开展抑制剂实验以确认低氧调控膜损伤MAPK机制中的关键信号通路。结果： EIMD后，低氧与常氧各组均出现明显膜损伤，低氧各组阳性细胞率显著高于常氧各组和对照组（P＜0.01）。低氧组ERK1、p38和BMK1通路的mRNA表达、蛋白含量和磷酸化水平显著高于常氧对应组（P＜0.05），JNK信号通路蛋白含量和磷酸化水平无显著变化（P＞0.05）。抑制剂实验结果表明，ERK1/2和p38抑制剂组的蛋白含量和磷酸化水平无显著变化（P＞0.05）。BMK1抑制剂组24 h、48 h的磷酸化水平、阳性细胞率显著低于安慰剂对应组（P＜0.001），且与对照组无显著差异（P＞0.05）。结论：1）EIMD后低氧明显加剧膜损伤并造成损伤峰值前移。2）低氧调控膜损伤主要通过BMK1通路实现，抑制BMK1磷酸化能阻止低氧对膜损伤的加剧作用。BMK1/ERK5通路是低氧调控EIMD后膜损伤MAPK机制的关键途径。

低氧；运动性肌损伤；肌细胞膜；细胞信号通路；丝裂原活化蛋白激酶

前言

运 动 性 肌 损 伤（exercise-induced muscle damage，EIMD）会导致肌纤维微损伤并伴随延迟性肌肉酸痛（DOMS）症状［40］。高原/低氧引起骨骼肌适应性萎缩和低氧（缺氧）对肌肉代谢［25，32］及细胞生物学功能的影响［25，32］一直是医学和训练学的研究热点，但因机制不明，高原/低氧训练后EIMD的有效恢复手段一直颇有争议。……