仝 静， 孙长宇， 杨黎冰， 梁亚林， 康艳楠

(郑州大学第一附属医院 感染科，郑州 450052)

论著/肝纤维化及肝硬化

胸腺肽α1对乙型肝炎肝硬化失代偿期患者淋巴细胞亚群的影响

仝 静， 孙长宇， 杨黎冰， 梁亚林， 康艳楠

(郑州大学第一附属医院 感染科，郑州 450052)

目的观察乙型肝炎肝硬化失代偿期患者应用胸腺肽α1后外周血淋巴细胞亚群的变化，分析胸腺肽α1对患者免疫功能的影响。方法选取2015年10月-2016年12月郑州大学第一附属医院收治的乙型肝炎肝硬化失代偿期患者106例，随机分为对照组和治疗组各53例，另选同期20例体检者作为健康组。对照组给予内科综合治疗，治疗组在综合治疗的基础上加用胸腺肽α1，分别于治疗前、治疗12周后使用流式细胞仪器检测患者外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞数、CD4+/CD8+比值、CD19百分比、NK细胞百分比。观察临床症状和并发症，以及不良反应发生情况。计量资料多组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验；两组间比较采用成组t检验或配对t检验。计数资料的组间比较采用χ2检验。结果治疗前，与健康组相比，治疗组和对照组患者外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞数、CD4+/CD8+比值、CD19百分比、NK细胞百分比均明显降低(P值均<0.05)；治疗12周后，与对照组相比，治疗组CD3+、CD4+、CD8+细胞数明显升高(t值分别为5.051、5.379、2.066，P值均<0.05)，CD4+/CD8+比值、CD19细胞百分比、NK细胞百分比有升高趋势(P值均>0.05)。治疗组治疗12周与治疗前相比，CD3+细胞数、CD4+细胞数、CD4+/CD8+比值明显升高(t值分别为7.647、7.851、4.384，P值均<0.001)。治疗过程中，出现的不良反应为头晕、头痛，对照组和治疗组患者不良反应发生率比较，差异无统计学意义(χ2=1.039，Ρ=0.308)。所有病例未发生严重不良反应。结论胸腺肽α1可明显改善乙型肝炎肝硬化失代偿患者淋巴细胞亚群比例失衡问题，提高患者免疫功能。

肝硬化； 肝炎， 乙型； 淋巴细胞亚群； 胸腺素

据2006年全国乙型肝炎流行病学调查显示，我国HBV感染人数约9300万人，其中约1/4将发展为慢性肝病，部分可发展为肝硬化。代偿期肝硬化进展为肝功能失代偿的年发生率为3%～5%，失代偿期肝硬化5年生存率为14%～35%[1]。失代偿期肝硬化患者多存在免疫功能低下，淋巴细胞亚群失调[2-3]，容易出现严重感染、肿瘤等。而胸腺肽α1作为免疫调节剂已广泛用于多种疾病的治疗，如重症感染、变态反应、神经内分泌疾病、各类肿瘤治疗及化疗后的免疫功能恢复等[4-5]。目前胸腺肽α1对治疗乙型肝炎肝硬化失代偿期患者免疫功能低下的疗效尚缺乏临床研究。本研究采用前瞻性分析，在乙型肝炎肝硬化失代偿期患者综合治疗基础上加用胸腺肽α1，并在治疗12周后复查相关指标，分析胸腺肽α1对于乙型肝炎肝硬化失代偿期患者淋巴细胞亚群的影响，进而了解患者免疫功能的变化。

1 资料与方法

1.1 研究对象 选取2015年10月-2016年12月本院收治的乙型肝炎肝硬化失代偿期患者，诊断均符合《慢性乙型肝炎防治指南(2015年更新版)》[1]中乙型肝炎肝硬化失代偿期诊断标准，通过病史及检查排除其他病因导致的肝硬化失代偿，如HCV感染、自身免疫性肝炎、酒精、药物等，同时排除各种肿瘤、血液病及风湿免疫系统疾病、脑血管病急性期及严重肝肾功能障碍和合并各种感染的患者。采用随机数字表分法分为治疗组和对照组。同时选择本院门诊健康体检者做为健康组。本研究经本院伦理委员会批准，所有治疗均获得患者及家属知情同意。

1.2 治疗方法 两组给予相同药物进行抗病毒、保护胃黏膜、护肝、补充人血白蛋白、引流腹水、维持水电解质平衡、调节肠道菌群、预防抗感染等内科综合治疗；治疗组在综合治疗的基础上加用1.6 mg 胸腺肽α1(和日，海南中和药业有限公司)皮下注射，2次/周，每次使用间隔3～4 d，治疗12周。

1.3 观察指标 应用本院感染科实验室流式细胞仪(FACS Calibur流式细胞仪，美国BD公司)监测所有患者治疗前、治疗12周外周血淋巴细胞亚群，观察患者外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞数、CD4+/CD8+比值、CD19百分比、自然杀伤细胞(NK细胞)百分比变化，同时监测所有患者的不良反应。

2 结果

2.1 一般资料 共收集乙型肝炎肝硬化失代偿期患者106例，其中男89例，女17例；年龄27～83岁，平均(53.2±11.1)岁。治疗组和对照组各53例。治疗前，2组患者在性别，年龄，CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数，CD4+/CD8+比值，CD19百分比，NK细胞百分比之间差异均无统计学意义(P值均>0.05)，具有可比性。健康组20例，其中男13例，女7例，年龄35～79岁，平均(58.0±12.9)岁，健康组与对照组、治疗组相比，性别、年龄差异均无统计学意义(P值均>0.05)。

2.2 3组治疗前、治疗12周外周血淋巴细胞亚群变化情况 治疗前，3组间各指标比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)，进一步两两间比较显示，健康组患者外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞数，CD4+/CD8+比值，CD19百分比，NK细胞百分比明显高于对照组和治疗组(P值均<0.05)，治疗组和对照组两组间各指标比较，差异均无统计学意义(P值均>0.05)。

治疗12周后，与对照组相比，治疗组CD3+、CD4+、CD8+细胞数明显升高(P值均<0.05)，CD4+/CD8+比值、CD19细胞百分比、NK细胞百分比有升高趋势(P值均>0.05)。

治疗组治疗12周与治疗前相比，CD3+细胞数、CD4+细胞数、CD4+/CD8+比值明显升高(t值分别为7.647、7.851、4.384，P值均<0.001)，CD8+细胞数、CD19细胞百分比、NK细胞百分比有升高趋势(P值均>0.05)(表1)。

2.3 临床症状及并发症发生情况 106例患者治疗12周后，治疗组53例患者中49例乏力纳差等症状明显好转，出现感染3例；对照组53例患者中31例乏力纳差等症状减轻，出现感染16例，给予抗感染治疗后感染均得到控制。治疗期间2组患者均未出现出血及危及生命的并发症。

2.4 不良反应发生情况 106例患者治疗过程中，治疗组出现1例头晕；对照组出现2例头晕，1例头痛。2组患者不良反应发生率比较，差异无统计学意义(χ2=1.039,P=0.308)。所有病例未发生严重不良反应。

3 讨论

乙型肝炎肝硬化患者由于HBV感染，机体的细胞免疫和体液免疫均降低，其中T淋巴细胞功能降低为免疫衰老的重要特征。而免疫调节治疗可通过促进淋巴细胞增殖，调整淋巴细胞亚群比例，提高患者免疫功能。本研究通过研究患者应用免疫调节剂(胸腺肽α1)前后淋巴细胞亚群的变化，为乙型肝炎肝硬化患者提供治疗建议，提高患者免疫功能，降低感染率，利于患者病情恢复。

外周血淋巴细胞亚群可直接反应出机体免疫功能状况，人外周血T淋巴细胞可分为3种不同亚群, 实验室通常检查CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群。其中CD3+T淋巴细胞反映外周血T淋巴细胞总数，CD4+T淋巴细胞为辅助性T淋巴细胞，可促进B淋巴细胞、细胞毒性T淋巴细胞和其他免疫细胞的增殖及分化，调节体液和细胞免疫。CD8+T淋巴细胞由细胞毒性T淋巴细胞和抑制性T淋巴细胞组成，CD8+T淋巴细胞是决定HBV清除状态的关键细胞亚群，细胞溶解或非溶解机制是CD8+T淋巴细胞清除机体感染HBV的主要方式。CD4+/CD8+比值的变化可直接反应机体的细胞免疫功能状态，正常情况下，在不同机体内CD4+/CD8+比值不同，但在正常范围内。B淋巴细胞经过抗原刺激产生抗体，在体液免疫中发挥重要作用，可以清除病毒抗原，在长期病毒抗原刺激下，机体的体液免疫相对于细胞免疫占主导地位。NK细胞是重要的天然免疫细胞，可通过杀伤和分泌细胞因子的方式对肿瘤细胞及病毒感染的细胞产生快速应答[6]。

胸腺肽α1是由28个氨基酸组成的多肽，其在免疫调节方面具有重要作用，已被广泛应用于临床，在疾病治疗过程中帮助患者恢复免疫功能[7-8]。在诱导和促进胸腺细胞的分化和成熟方面，胸腺肽α1可促进胸腺内的骨髓干细胞转化为T淋巴细胞，并进一步分化为不同功能亚群，这是其最基本的调节作用。另外胸腺肽α1还可刺激干细胞增殖并增加NK细胞、CD4+、CD8+T淋巴细胞的产生，同时还增加IFN、IL-2等多种活性物质，刺激并促进T淋巴细胞分化、成熟，使紊乱的免疫功能逐渐恢复，发挥免疫保护作用[9-11]。本研究2组患者治疗前外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞数、CD4+/CD8+比值、CD19百分比、NK细胞百分比明显降低。在使用胸腺肽α1治疗后，与对照组相比，治疗组淋巴细胞亚群中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数升高较为明显，CD4+/CD8+比值、CD19细胞百分比、NK细胞有所升高，表明胸腺肽α1可有效改善乙型肝炎肝硬化失代偿期患者的免疫功能。

表1 3组治疗前和治疗12周外周血淋巴细胞亚群变化情况比较

注：1)与健康组比较，P<0.05;2)与治疗前治疗组比较，P<0.05

总之，乙型肝炎肝硬化失代偿期患者易出现外周血淋巴细胞亚群失衡，治疗过程中加用胸腺肽α1可明显改善T淋巴细胞亚群比例失衡问题，提高患者免疫功能，利于患者病情恢复。但本研究样本量较少，研究时间短，资料收集不完整(比如失代偿期分级未进一步研究等)，分析过程中难免有误差，胸腺肽α1对改善乙型肝炎肝硬化失代偿期患者免疫功能的长期疗效还有待进一步研究。

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引证本文：TONG J, SUN CY, YANG LB, et al. Effect of thymosin α1 on lymphocyte subsets in patients with decompensated hepatitis B cirrhosis[J]. J Clin Hepatol, 2017, 33(11): 2132-2135. (in Chinese)

仝静, 孙长宇, 杨黎冰, 等. 胸腺肽α1对乙型肝炎肝硬化失代偿期患者淋巴细胞亚群的影响[J]. 临床肝胆病杂志, 2017, 33(11): 2132-2135.

(本文编辑：朱 晶)

Effectofthymosinα1onlymphocytesubsetsinpatientswithdecompensatedhepatitisBcirrhosis

TONGJing,SUNChangyu,YANGLibing,etal.

(DepartmentofInfectiousDiseases,TheFirstAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China)

ObjectiveTo investigate the change in peripheral blood lymphocyte subsets after the application of thymosin α1 in patients with decompensated hepatitis B cirrhosis, as well as the effect of thymosin α1 on immune function.MethodsA total of 106 patients with decompensated hepatitis B cirrhosis who were admitted to The First Affiliated Hospital of Zhengzhou University from October 2015 to December 2016 were enrolled and randomly divided into control group and treatment group, with 53 patients in each group, and 20 healthy subjects who underwent physical examination were enrolled as healthy group. The patients in the control group were given comprehensive medical treatment, and those in the treatment group were given thymosin α1 in addition to the comprehensive medical treatment. Flow cytometry was used to measure peripheral blood CD3+, CD4+, and CD8+cells, CD4+/CD8+ratio, and percentages of CD19 cells and natural killer (NK) cells before treatment and after 12 weeks of treatment. Clinical symptoms, complications, and adverse events were observed. An analysis of variance was used for comparison of continuous data between multiple groups, and the least significant differencet-test was used for further comparison between any two groups; the independent-samplesttest or pairedt-test was used for comparison between two groups. The chi-square test was used for comparison of categorical data between groups.ResultsBefore treatment, the treatment group and the control group had significantly lower numbers of peripheral blood CD3+, CD4+, and CD8+cells, CD4+/CD8+ratio, and percentages of CD19 cells and NK cells than the healthy group (allP<0.05). After 12 weeks of treatment, the treatment group showed significant increases in the numbers of CD3+and CD4+cells and CD4+/CD8+ratio(t=7.647,7.851, and 4.384, allP<0.001); compared with the control group, the treatment group had significantly increased numbers of CD3+, CD4+, and CD8+cells (t=5.051, 5.379, and 2.066, allP<0.05) and slightly increaseed CD4+/CD8+ratio and percentages of CD19 cells and NK cells (allP>0.05). The adverse events during treatment included dizziness and headache, and there was no significant difference in the incidence rate of adverse events between the control group and the treatment group (χ2=1.039,P=0.308). No patient experienced serious adverse events.ConclusionIn patients with decompensated hepatitis B cirrhosis, thymosin α1 can significantly improve the imbalance of lymphocyte subsets and enhance their immune function.

liver cirrhosis； hepatitis B； lymphocyte subsets； thymosin

R512.62; R575.2

A

1001-5256(2017)11-2132-04

10.3969/j.issn.1001-5256.2017.11.016

2017-05-17；

2017-07-03。

河南省医学科技攻关计划项目(152102310045)

仝静(1991-)，女，主要从事肝病及感染性发热疾病的研究。

孙长宇，电子信箱: changyu8188@163.com。