苏柯 邱榆程 王春梅 袁志

人参皂苷 Rb2 在体外调控破骨细胞的作用

苏柯 邱榆程 王春梅 袁志

目的 探究人参皂苷 Rb2 在体外对破骨细胞的作用及机制。方法 通过培养 RAW264.7 破骨前体细胞，加入不同浓度 Rb2 溶液 ( 0.1 μM，1 μM，10 μM )，采用 CCK-8 检测 Rb2 药物毒性，利用 TRAP 染色观察破骨细胞形态并计数，使用 RT-PCR 方法检测 TRAP、NFATc1 破骨活动特异性基因 mRNA 的表达，通过 Western blot 技术检测破骨细胞中 LC3 I、LC3 II、mTOR 的蛋白表达水平。结果 TRAP 阳性计数，与空白对照组相比 ( 168.2±22.6 )，0.1 μM 组 ( 131.0±16.3 )，P＝0.018；1 μM 组 ( 98.8±17.9 )，P＜0.01； 10 μM 组( 85.8±17.3 )，P＜0.01，破骨细胞数量明显减少。对照组 TRAP、NFATc1 破骨分化特异性基因 mRNA 表达明显下降，与对照组相比各组 P＜0.01。LC3 II / LC3 I 的比值显著增高，mTOR 量下降，与对照组相比各组 P＜0.01。结论 Rb2 可能通过自噬途径影响破骨基因的表达，从而减少破骨细胞的形成，mTOR 通路在此过程中起重要作用。

人参皂甙类；破骨细胞；自噬；骨质疏松

骨质疏松症是常见的老年病之一，同时也是一个世界性的、主要的、不断增长的骨骼健康问题。它主要表现为骨量减少、骨微结构损害，导致骨脆性增加、易发骨折[1]。

目前许多治疗骨质疏松的西药，如双磷酸盐类药物，有很多副作用，包括骨坏死、股骨非典型性骨质和肾功能障碍等[2-3]。与之相比，有些天然的中药单体副作用少、生物活性高，并且能够长期服用，也许会是一个更好地预防和治疗骨质疏松症的选择。

本课题组前期研究发现，人参皂苷 Rb2 呈剂量依赖性地抑制高剂量地塞米松诱导的小鼠骨髓间充质干细胞的细胞凋亡[4]。还发现绝经后骨质疏松小鼠模型中，Rb2 能明显改善骨质疏松骨的骨微结构，提高了骨矿物质密度并且促进了 MC3T3-E1 成骨前体细胞的细胞增殖[5]。……